Mikroskopische Analyse von Sputum

Die mikroskopische Untersuchung von nativem und festen gefärbten Sputumproben erlaubt eine detaillierte Untersuchung seiner Zellstruktur, und zu einem gewissen Grad spiegelt die Art des pathologischen Prozesses in der Lunge und die Bronchien, seine Aktivität, die unterschiedliche Faser und Kristallbildung zu identifizieren, auch wichtigen diagnostischen Wert hat, und schließlich bewertet etwa die Bedingung mikrobielle Flora der Atemwege (Bakterioskopie).

Bei der Mikroskopie verwenden Sie die nativen und gemalten Präparationen des Auswurfs. Zur Untersuchung der mikrobiellen Flora (Bakterioskopie) werden Sputum-Abstriche üblicherweise von Romanovsky-Giemsa nach Gram und zum Nachweis von Mycobacterium tuberculosis, aber von Cilu-Nielsen gefärbt.

Zelluläre Elemente und elastische Fasern

Von den zellulären Elementen, die im Sputum von Patienten mit Pneumonie nachgewiesen werden können, sind Epithelzellen, Alveolarmakrophagen, Leukozyten und Erythrozyten von diagnostischer Bedeutung.

Epithelzellen. Plattenepithel hat nicht aus dem Mund, Nasenrachenraum, die Stimmlippen und die Epiglottis diagnostischen Wert, obwohl die Erfassung einer großen Anzahl von Plattenepithel - Zellen, in der Regel ein niedriges Qualität Sputumprobe zum Labor und im Speichel , die wesentliche Verunreinigung geliefert anzeigt.

Bei Patienten mit Pneumonie gilt Sputum als geeignet für die Untersuchung, wenn bei einer Mikroskopie mit geringem Anstieg die Zahl der Epithelzellen im Gesichtsfeld 10 nicht übersteigt. Eine größere Anzahl von Epithelzellen weist auf eine inakzeptable Vorherrschaft von oropharyngealen Inhalten in der biologischen Probe hin.

Alveolare Makrophagen, die in kleinen Mengen auch in jedem Sputum gefunden werden können, sind große Zellen retikulohystozytischen Ursprungs mit einem exzentrisch gelegenen großen Kern und reichlich vorhandenen Einschlüssen im Cytoplasma. Diese Einschlüsse können aus Makrophagen bestehen, die von den kleinsten Staubpartikeln (Staubzellen), Leukozyten und dergleichen absorbiert werden. Die Anzahl der Alveolarmakrophagen nimmt mit entzündlichen Prozessen im Lungenparenchym und den Atemwegen, einschließlich Lungenentzündung, zu.

Zellen des zylindrischen Wimperepithels, die die Schleimhaut des Kehlkopfes, der Trachea und der Bronchien auskleiden. Sie sehen wie längliche Zellen aus, die an einem Ende verbreitert sind, wo sich der Kern und die Zilien befinden. Zellen des zylindrischen Wimperepithels finden sich in jedem Sputum, ihr Anstieg weist jedoch auf eine Schädigung der Bronchialschleimhaut und der Trachea (akute und chronische Bronchitis, Bronchiektase, Tracheitis, Laryngitis) hin.

Leukozyten in kleinen Mengen (2-5 im Sichtfeld) finden sich in jedem Sputum. Bei Entzündungen des Lungengewebes oder der Bronchialschleimhaut und Trachea, insbesondere bei Eiterung (Gangrän, Lungenabszess, Bronchiektasen), ist deren Anzahl signifikant erhöht.

Bei der Färbung von Sputumpräparaten nach Romanovsky-Giemsa können einzelne Leukozyten differenziert werden, was manchmal einen wichtigen diagnostischen Wert hat. So steigt bei ausgeprägter Entzündung des Lungengewebes oder der Bronchialschleimhaut sowohl die Gesamtzahl der neutrophilen Leukozyten als auch die Anzahl ihrer degenerativen Formen mit Fragmentierung der Zellkerne und Zerstörung des Zytoplasmas.

Eine Zunahme der Anzahl der degenerativen Formen der Leukozyten ist das wichtigste Zeichen für die Aktivität des Entzündungsprozesses und des schwereren Krankheitsverlaufs.

Erythrozyten. Einzelne Erythrozyten können praktisch und Sputum nachgewiesen werden. Ein signifikanter Anstieg wird beobachtet, wenn die vaskuläre Permeabilität bei Patienten mit Pneumonie, mit Zerstörung von Lungen- oder Bronchialgewebe, Stagnation in einem kleinen Kreislauf, Lungeninfarkt usw. Beeinträchtigt ist. In einer großen Anzahl von roten Blutkörperchen im Sputum werden während Hämoptysen jeglicher Genese gefunden.

Elastische Fasern. Ein weiteres Element von Sputum-Plastikfasern, die im Sputum erscheinen, wenn Zerstörung des Lungengewebes (Lungenabszess, Tuberkulose, sich zersetzender Lungenkrebs, etc.) erwähnt werden sollte. Elastische Fasern werden im Sputum in Form von dünnen zweikonturigen, gekräuselten Filamenten mit dichotomer Teilung an den Enden präsentiert. Das Auftreten von elastischen Fasern im Sputum bei Patienten mit schwerer Lungenentzündung zeigt das Auftreten einer der Komplikationen der Erkrankung - Abszess von Lungengewebe. In einigen Fällen können bei der Bildung eines Lungenabszesses elastische Fasern im Sputum sogar etwas früher als die entsprechenden radiographischen Veränderungen nachgewiesen werden.

Häufig können bei croupöser Pneumonie, Tuberkulose, Aktinomykose, fibrinöser Bronchitis in Sputumpräparaten dünne Fibrinfasern nachgewiesen werden.

Anzeichen eines aktiven Entzündungsprozesses in der Lunge sind:

1. die Art des Sputums (mukopurulent oder eitrig);
2. eine Zunahme der Anzahl von Neutrophilen im Sputum einschließlich ihrer degenerativen Formen;
3. eine Zunahme der Anzahl von Alveolarmakrophagen (von einzelnen Clustern mehrerer Zellen im Sichtfeld und mehr);

Das Auftreten von elastischen Fasern im Sputum zeigt die Zerstörung des Lungengewebes und die Bildung eines Lungenabszesses an.

Die endgültigen Schlussfolgerungen über das Vorhandensein und den Grad der Aktivität der Entzündung und Zerstörung des Lungengewebes bilden sich nur, wenn sie mit dem klinischen Bild der Krankheit und den Ergebnissen anderer Labor- und instrumenteller Untersuchungsmethoden verglichen werden.

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Mikrobielle Flora

Die nach Gram gefärbte Abstrichmikroskopie und die Untersuchung der Mikrobenflora (Bakterioskopie) bei einem Teil der Patienten mit Pneumonie erlauben vorläufig, den wahrscheinlichsten Erreger der Lungeninfektion festzustellen. Diese einfache Methode der Express-Diagnostik des Erregers ist nicht genau genug und sollte nur in Kombination mit anderen (mikrobiologischen, immunologischen) Methoden der Sputumuntersuchung verwendet werden. Die Immersionsmikroskopie gefärbter Abstriche ist manchmal sehr nützlich für die Notfallauswahl und die Verabreichung einer adäquaten antibiotischen Therapie. Man sollte jedoch die Möglichkeit einer Kontamination des Bronchialinhalts der Mikroflora der oberen Atemwege und der Mundhöhle im Auge behalten, insbesondere wenn die Sputumsammlung nicht ordnungsgemäß gesammelt wird.

Daher wird Sputum nur dann als geeignet für weitere Untersuchungen (Bakterioskopie und mikrobiologische Untersuchung) angesehen, wenn es die folgenden Bedingungen erfüllt:

• Gram-Färbung im Sputum zeigt eine große Anzahl von Neutrophilen (mehr als 25 im Sichtfeld mit einer kleinen Vergrößerung des Mikroskops);
• Die Anzahl der Epithelzellen, die charakteristischer für den Inhalt des Oropharynx sind, überschreitet nicht 10;
• Bei der Zubereitung überwiegen Mikroorganismen des gleichen morphologischen Typs.

Auf Gram-Färbung von Sputum in einem Abstriche manchmal gut genug sein, um zu identifizieren gram Pneumokokken, Streptokokken, Staphylokokken und gram-negativen Bakterien Gruppe -. Klebsiellu, stab Pfeiffer, E. Coli und andere Gram-positiven Bakterien in diesem Fall blau werden, und Gram - rot.

Bakterielle Pathogene von Lungenentzündung

Gram-positiv	Gram-negativ
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Staphylokokkus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klöster  (Klebsiella pneumoniae) Hämophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionellen (Legionellenpneumophilie) E. Coli (Escherichia coli)

Pre Sputumausstrich ist der einfachste Weg, an einer Lungenentzündung Erreger Verifikation und hat einen bestimmten Wert für die Auswahl der optimalen Antibiotika-Therapie. Wenn zum Beispiel Verschmierungen gefärbt durch Gram, grompolozhitelnyh Diplokokken (Pneumokokken) oder Staphylokokken anstelle von Breitspektrum-Antibiotika, die Erhöhung der Gefahr der Selektion und Vermehrung von Mikroorganismen aitibiotikorezistentnyh möglich zuzuweisen, die eine gezielte Therapie, aktiv gegen Staphylokokken, Pneumokokken oder zu detektieren. In anderen Fällen Detektion des dominanten Flora in dem Gram-Abstriche anzuzeigen pas kann, die Pneumonien Enterobacteriaceae sind gram-negative (Klebsiella, E. Coli, etc.) verursacht, die eine entsprechendes Ziel gezielte Therapie erfordert.

Jedoch kann die vorläufige Schlußfolgerung des wahrscheinlichen Erregers der pulmonalen Infektion durch Mikroskopie nur basierend pas signifikante Zunahme von Bakterien in Sputum, in einer Konzentration von 10 durchgeführt wird ⁶ 10 - ⁷  mikrobiellen Zellen / ml oder mehr (LL Vishnjakova). Geringe Konzentrationen von Mikroorganismen (<10 ³  m.ks / ml) sind charakteristisch für die begleitende Mikroflora. Wenn die Konzentration der mikrobiellen Körper von 10 ⁴  bis 10 ⁶  m.ks / ml variiert , schließt dies die ätiologische Rolle dieses Mikroorganismus beim Auftreten einer Lungeninfektion nicht aus, beweist es aber nicht.

Es sollte auch daran erinnert werden, dass "atypische" intrazelluläre Pathogene (Mycoplasma,  Legionellen, Chlamydien, Rickettsien) kein Gramm färben. In diesen Fällen kann der Verdacht auf eine "atypische" Infektion auftreten, wenn Abstriche eine Dissoziation zwischen einer großen Anzahl von Neutrophilen und einer extrem kleinen Anzahl von mikrobiellen Zellen zeigen.

Unglücklicherweise hat die Methode der Bakterioskopie im allgemeinen eine geringe Empfindlichkeit und Spezifität. Der Vorhersagewert selbst für gut visualisierte Pneumokokken erreicht kaum 50%. Dies bedeutet, dass die Methode in der Hälfte der Fälle falsch positive Ergebnisse liefert. Dies ist aus mehreren Gründen, einer davon ist die Tatsache, dass etwa ein Drittel der Patienten vor Hospitalisierung Antibiotika erhalten hat, die stark die Wirksamkeit von Sputumausstrich reduziert. Ferner kann selbst im Fall der positiven Ergebnisse der Studie, eine ausreichend hohe Konzentration im Abstrich „typischen“ bakteriellen Pathogenen (z.B. Pneumococcen), das anzeigt, kann nicht vollständig ausgeschlossen werden, das Vorhandensein von Co-Infektion „atypische“ intrazelluläre Pathogene (Mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Die von Gram gefärbte Methode der Bakterioskopie von Sputumabstrichen hilft in einigen Fällen, den Erreger der Pneumonie zu verifizieren, obwohl sie im Allgemeinen einen sehr geringen Vorhersagewert hat. Atypische intrazelluläre Pathogene (Mycoplasmen, Legionellen, Chlamydien, Rickettsien) werden durch die Methode der Bakterioskopie nicht nachgewiesen, da sie kein Gramm färben.

Es sollte die Möglichkeit der mikroskopischen Diagnose bei Patienten mit Lungenentzündung Pilzinfektion der Lunge erwähnt werden. Für Patienten, die eine Langzeitbehandlung mit Breitspektrumantibiotika erhalten, ist der Nachweis von Candida albicans-Sputum in Form von hefeähnlichen Zellen und verzweigtem Mycel durch Mikroskopie von nativen oder gefärbten Sputumpräparaten am relevantesten. Sie weisen auf eine Veränderung der Mikroflora des tracheobronchialen Inhalts hin, die unter dem Einfluss einer antibiotischen Behandlung auftritt, die eine wesentliche Korrektur der Therapie erfordert.

In einigen Fällen bei Patienten mit Lungenentzündung besteht die Notwendigkeit, die bestehende Lungenerkrankung mit Tuberkulose zu differenzieren. Zu diesem Zweck wird die Farbe des Sputum-Abstrichs nach Tsiol-Nielsen verwendet, was in einigen Fällen die Identifizierung des Mycobacterium tuberculosis ermöglicht, obwohl das negative Ergebnis einer solchen Untersuchung nicht bedeutet, dass der Patient keine Tuberkulose hat. Bei der Färbung von Sputum nach Tsil-Nielsen ist Mycobacterium tuberculosis rot gefärbt und alle anderen Sputumelemente sind blau. Tuberkulöse Mykobakterien haben das Aussehen von Fäkalien, geraden oder leicht gekrümmten Stäben unterschiedlicher Länge mit getrennten Verdickungen. Sie befinden sich in der Zubereitung in Gruppen oder einzeln. Diagnostischer Wert ist der Nachweis bei der Herstellung von sogar einzelnen Mykobakterien Tuberkulose.

Um die Wirksamkeit des mikroskopischen Nachweises von Mykobakterien Tuberkulose zu erhöhen, verwenden Sie eine Reihe von zusätzlichen Methoden. Am gebräuchlichsten ist die so genannte Flotationsmethode, bei der homogenisiertes Sputum mit Toluol, Xylol oder Benzin geschüttelt wird, deren Tröpfchen auftauchen und Mykobakterien einfangen. Nach dem Absetzen des Sputums wird die oberste Schicht auf den Objektträger pipettiert. Dann wird das Medikament von Tsilyu-Nielsen fixiert und gefärbt. Es gibt andere Methoden der Akkumulation (Elektrophorese) und der Mikroskopie von Tuberkulosebakterien (Lumineszenzmikroskopie).

Mikroskopische Untersuchung (Analyse) von Schleim erlaubt, Schleim, zelluläre Elemente, faserige und kristalline Formationen, Pilze, Bakterien und Parasiten zu erkennen.

Zellen

• Alveolare Makrophagen sind Zellen retikulogistocyten Ursprungs. Eine große Anzahl von Makrophagen im Sputum wird in chronischen Prozessen und im Stadium der Auflösung akuter Prozesse im bronchopulmonalen System nachgewiesen. Alveolare Makrophagen mit Hämosiderin ("Zellen von Herzfehlern") sind mit einem leichten Infarkt, Blutung, Stagnation in einem kleinen Kreis der Blutzirkulation nachgewiesen. Makrophagen mit Lipidtröpfchen sind ein Zeichen für einen obstruktiven Prozess in den Bronchien und Bronchiolen.
• Xantomzellen (fettige Makrophagen) finden sich in Abszessen, Aktinomykose, Echinokokkose der Lunge.
• Zellen des zylindrischen Wimperepithels sind Zellen der Schleimhaut des Kehlkopfes, der Luftröhre und der Bronchien; Sie finden sich bei Bronchitis, Tracheitis, Bronchialasthma, malignen Neoplasmen der Lunge.
• Das flache Epithel wird erkannt, wenn Spucke in das Sputum gelangt, es hat keine diagnostische Bedeutung.
• Leukozyten in der einen oder anderen Menge sind in jedem Sputum vorhanden. Eine große Anzahl von Neutrophilen wird in mukopurulentem und eitrigem Sputum nachgewiesen. Eosinophile sind reich an Sputum bei Bronchialasthma, eosinophiler Pneumonie, Glottis-Lungenläsionen und Lungeninfarkt. Eosinophile können im Sputum für Tuberkulose und Lungenkrebs auftreten. Lymphozyten in großer Zahl finden sich bei Keuchhusten und seltener bei Tuberkulose.
• Erythrozyten. Der Nachweis einzelner roter Blutkörperchen im Sputum ist nicht von diagnostischer Bedeutung. Wenn frisches Blut im Sputum vorhanden ist, werden unveränderte Erythrozyten bestimmt, aber wenn das Blut, das lange Zeit in den Atemwegen war, mit Sputum zurückbleibt, dann werden ausgelaugte rote Blutkörperchen gefunden.
• Zellen von bösartigen Tumoren werden in bösartigen Neoplasmen gefunden.

Fasern

• Elastische Fasern erscheinen im Zerfall des Lungengewebes, was mit der Zerstörung der Epithelschicht und der Freisetzung elastischer Fasern einhergeht; sie finden sich in Tuberkulose, Abszess, Echinokokkose, Neubildungen in der Lunge.
• Koronare Fasern werden bei chronischen Lungenerkrankungen wie Schwellentuberkulose nachgewiesen.
• Kalzinierte elastische Fasern sind elastische Fasern, die mit Calciumsalzen imprägniert sind. Ihr Nachweis im Sputum ist charakteristisch für den Abbau der tuberkulösen Petrichitis.

Spiralen, Kristalle

• Kurshman Spiralen sind im spastischen Zustand der Bronchien und der Anwesenheit von Schleim in ihnen gebildet. Während eines Hustenstoßes wird visköser Schleim in das Lumen eines größeren Bronchus freigesetzt, der sich spiralförmig verdreht. Kurshman Spiralen erscheinen mit Bronchialasthma, Bronchitis, Lungentumoren, komprimierende Bronchien.
• Die Charcot-Leiden-Kristalle sind das Produkt des Zerfalls von Eosinophilen. Normalerweise erscheinen in einem Sputum mit Eosinophilen; sind charakteristisch für Bronchialasthma, allergische Zustände, eosinophile Infiltrate in der Lunge, Lungenegel.
• Cholesterin-Kristalle erscheinen mit Abszess, Lungen-Echinokokkose, Neubildungen in der Lunge.
• Kristalle von Hämatoidin sind charakteristisch für Abszess und Gangrän der Lunge.
• Actinomyceten-Drusen werden in der Aktinomykose der Lunge nachgewiesen.
• Elemente von Echinococcus erscheinen mit Echinokokkose der Lungen.
• Korken Dietrich - Klumpen von gelb-grauer Farbe, mit einem unangenehmen Geruch. Sie bestehen aus Detritus, Bakterien, Fettsäuren, Fetttröpfchen. Sie sind typisch für einen Abszess der Lunge und Bronchiektasen.
• Ehrlichs Tetrade besteht aus vier Elementen: verkalktem Detritus, verkalkten elastischen Fasern, Cholesterinkristallen und Mycobacterium tuberculosis. Erscheint im Zerfall des verkalkten primären Tuberkularfokus.

Mycel und knospende Pilzzellen treten in Pilzläsionen des bronchopulmonalen Systems auf.

Pneumocystis tritt bei Pneumocystis-Pneumonie auf.

Pilzkügelchen werden in der Kokzidioidomykose der Lunge nachgewiesen.

Die Askaridenlarven werden mit Askariasis nachgewiesen.

Larven des intestinalen Ugristins werden mit Strongyloidiasis identifiziert.

Die Eier des Lungenflügels werden mit Paragonimose identifiziert.

Elemente im Sputum bei Bronchialasthma gefunden. Wenn Bronchialasthma in der Regel durch eine kleine Menge von Schleim, viskösen Sputum getrennt ist. Makroskopisch kann man die Kurshman-Spirale sehen. Wenn mikroskopische Forschung charakteristisch für das Vorhandensein von Eosinophilen, zylindrischem Epithel, ist, gibt es Kristalle von Charcot-Leiden.