Bakteriologische Untersuchung von Sputum

Die rechtzeitige Identifizierung des Infektionserregers ist für die richtige Wahl des antibakteriellen Arzneimittels sehr wichtig, um die Entwicklung von Bakterienresistenzen bei empirisch verschriebenen Antibiotika zu verhindern. Die Gramfärbung ist die gängigste Methode zur Färbung aller Arten von Patientenmaterial (Sputum, bronchoalveoläre Lavage usw.) zur schnellen und ungefähren Identifizierung des Infektionserregers.

Eine vorläufige Beurteilung eines möglichen ätiologischen Agens erfolgt mittels Bakterioskopie eines gramgefärbten Sputumausstrichs. Ein gramgefärbter Sputumausstrich wird vor dem Ausbringen auf Nährmedien untersucht, um seine Eignung für die Kultivierung zu beurteilen und den wahrscheinlichen Erreger zu identifizieren. Sputum gilt als geeignet, wenn im gramgefärbten Ausstrich bei geringer Vergrößerung unter dem Mikroskop mehr als 25 Leukozyten und weniger als 10 Epithelzellen gefunden werden. Anzeichen einer hochwertigen Sputumprobe, die zur Kultivierung verwendet werden kann, sind ein Überwiegen von Leukozyten gegenüber Epithelzellen sowie das Vorhandensein von Bakterien einer Art, die sich innerhalb oder um die Leukozyten herum befinden. Grampositive Bakterien im Präparat sind dunkelblau, gramnegative Bakterien rosa. Die Erreger einer atypischen Lungenentzündung (Mykoplasmen, Legionellen, Rickettsien und Chlamydien) werden durch Gram nicht angefärbt, daher werden zu ihrem Nachweis hauptsächlich serologische Methoden eingesetzt.

Die Sputumfärbung nach Ziehl-Neelsen dient dem Nachweis säurefester Stäbchen, vor allem Tuberkulosemykobakterien. Das Präparat wird aus eitrigen Sputumpartikeln hergestellt, die an 4–6 verschiedenen Stellen entnommen werden. Die ausgewählten Partikel werden sorgfältig zwischen zwei Objektträgern zu einer homogenen Masse zermahlen, an der Luft getrocknet und über einer Brennerflamme fixiert. Tuberkulosemykobakterien sind rot gefärbt, alle anderen Bestandteile des Sputums und der Bakterien blau. Tuberkulosemykobakterien haben die Form dünner, leicht gebogener Stäbchen unterschiedlicher Länge mit Verdickungen an den Enden oder in der Mitte. Sie kommen in Gruppen oder einzeln vor. Der Nachweis von Tuberkulosemykobakterien ist das zuverlässigste Anzeichen einer tuberkulösen Lungenerkrankung. Die Ziehl-Neelsen-Ausstrichfärbung für aktive Formen der Lungentuberkulose hat eine Sensitivität von 50 % und eine Spezifität von 80–85 %.

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