Mikrobiologische Untersuchung von Sputum

Die mikrobiologische Untersuchung ist das wichtigste Glied in der diagnostischen Suche und Verifizierung des Erregers einer Lungenentzündung. Dabei geht es nicht nur um die Isolierung des Erregers, sondern auch um die Untersuchung seiner Eigenschaften, einschließlich der Empfindlichkeit gegenüber verschiedenen Medikamenten mit bakterizider und bakteriostatischer Wirkung.

Zu diesem Zweck wird die Methode der Sputumaussaat auf verschiedenen Nährmedien verwendet. In einer an das Labor gelieferten Sputumprobe werden eitrige Klumpen ausgewählt und in einer Petrischale sorgfältig mit einer isotopischen Natriumchloridlösung gewaschen, wodurch sie bis zu einem gewissen Grad von der Mikroflora der oberen Atemwege befreit werden können. Die Aussaat eitriger Sputumklumpen erfolgt auf verschiedenen Nährmedien, deren Zusammensetzung in speziellen Handbüchern zur Mikrobiologie beschrieben ist. Die Medien mit den Aussaaten werden 24 Stunden bei 37,5 ° C inkubiert. Aus den gewachsenen Kolonien werden Reinkulturen isoliert, mit bekannten mikrobiologischen Methoden identifiziert und ihre Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika bestimmt.

Zur quantitativen Bestimmung des Mikroorganismengehalts wird der Sputum homogenisiert, mit Nährlösung vermischt und daraus sukzessive zehnfach verdünnte Proben hergestellt, die auf Petrischalen mit Blutagar aufgetragen werden. Nach 24 Stunden Inkubation bei 37,5 °C werden die Ergebnisse ausgewertet, wobei Kolonien gleichen Aussehens gezählt und der Verdünnungsgrad des Materials berücksichtigt werden. Aus den Kolonien werden Ausstriche hergestellt und unter dem Mikroskop untersucht.

Interpretation der Ergebnisse

Die Interpretation der Ergebnisse der mikrobiologischen Untersuchung von Sputum ist recht komplex, was durch eine Reihe von Faktoren erklärt wird. Oben wurde bereits die ständige Ansiedlung von Bronchialinhalten mit der Mikroflora der oberen Atemwege und der Mundhöhle sowie das häufige Vorhandensein der meisten typischen Erreger von Atemwegserkrankungen (Pneumokokken, Streptokokken, Staphylokokken usw.) im normalen Tracheobronchialinhalt gesunder Menschen erwähnt. In dieser Hinsicht erschwert die Isolierung einer Assoziation verschiedener Mikroorganismen im Sputum während mikrobiologischer Untersuchungen, von denen die meisten in diesem speziellen Fall opportunistisch sind, die Feststellung des Erregers der Krankheit äußerst. Um die Ergebnisse der mikrobiologischen Untersuchung des Sputums zu interpretieren, ist es daher notwendig, das quantitative Vorherrschen einer bestimmten Bakterienart (mehr als 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), das Auftreten bestimmter Mikroorganismen in der Exazerbationsphase und ihr Verschwinden während der Remissionsphase zu berücksichtigen. Es ist sehr wichtig, das klinische Bild der Krankheit zu berücksichtigen.

Die wichtigsten und möglichen Erreger verschiedener klinischer Formen der Lungenentzündung

Klinische Form der Lungenentzündung	Haupterreger	Mögliche Krankheitserreger
Croupous	Pneumokokken	Streptokokken, Klebsiella
Post-Influenza	Staphylokokken, Pneumokokken, Klebsiella	Haemophilus influenzae, Streptokokken
Abszesse	Staphylokokken, Bakteroide, Mischflora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiration	Bacteroides, anaerobe Streptokokken	Staphylokokken, Pneumokokken
Postoperativ	Staphylokokken	Pneumokokken, Klebsiella
Interstitielle	Mykoplasmen	Erreger der Ornithose, Psittakose
Sekundäre Pneumonie bei Krankenhauspatienten ohne vorherige antibakterielle Therapie	Staphylokokken, Pneumokokken, Klebsiella, Bacteroides	Escherichia coli, Serratia usw.
Sekundäre Lungenentzündung entwickelte sich vor dem Hintergrund der antibakteriellen Therapie	Fakultativ pathogene Mikroorganismen	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus usw.
Bei Patienten mit chronischer Bronchitis	Pneumokokken, Haemophilus influenzae	Staphylokokken, Streptokokken
Bei Patienten mit Alkoholismus	Pneumokokken, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, Protozoen
Beim erworbenen Immunschwächesyndrom	Pneumocystis, Pilze	Zytomegalieviren
Bei Patienten, deren Betreuung durch Dritte erfolgt	Pneumokokken, Staphylokokken, hämophile Papille	Klebsiella, Escherichia coli

Bei der quantitativen Bewertung der Ergebnisse der Untersuchung der mikrobiellen Kontamination bei Patienten mit Lungenentzündung muss die extrem hohe Sensitivität dieses Indikators gegenüber der Verschreibung von Antibiotika berücksichtigt werden. Selbst eine kurzfristige Behandlung mit antibakteriellen Medikamenten kann zu einem starken Rückgang der mikrobiellen Kontamination führen, was eine ausreichende Beurteilung der Ergebnisse der Sputumuntersuchung nicht zulässt. Daher ist es ratsam, vor der Verschreibung einer Antibiotikabehandlung Sputum zu sammeln.

Zu beachten ist zudem, dass zur Kultivierung intrazellulärer Pneumonieerreger (Mykoplasmen, Legionellen, Chlamydien, Rickettsien) spezielle selektive Nährmedien verwendet werden. Routinemäßige mikrobiologische Untersuchungen mit konventionellen Nährmedien (Agar-Agar) führen nie zu positiven Ergebnissen. Daher sollte die Wahl spezifischer mikrobiologischer Untersuchungsmethoden unter Beteiligung des behandelnden Arztes erfolgen, der den Laborarzt über seinen Verdacht hinsichtlich der möglichen Rolle intrazellulärer Erreger beim Auftreten einer Pneumonie bei diesem Patienten informieren muss.

Es sollte hinzugefügt werden, dass in der klinischen Praxis selbst eine technisch einwandfreie mikrobiologische Untersuchung des Sputums in höchstens 40–60 % der Fälle eine Identifizierung des Erregers ermöglicht. Daher können andere moderne Forschungsmethoden zum Nachweis des Erregers eingesetzt werden. Der Informationsgehalt einer bakteriologischen Untersuchung kann deutlich erhöht werden, wenn anstelle von Sputum Tracheobronchialaspirat, Flüssigkeit aus der bronchoalveolären Lavage (BAL), Bronchoskopie usw. als Untersuchungsmaterial verwendet wird.

Darüber hinaus können die Immunfluoreszenz verschiedener biologischer Materialien (Bronchoskopiematerial, Blut, Pleurainhalt usw.), PCR-Diagnosemethoden und die Untersuchung des Spiegels spezifischer Antikörper im Blutserum zur Identifizierung von Lungenentzündungserregern eingesetzt werden. Leider haben diese Diagnosemethoden noch keine breite klinische Anwendung gefunden und werden derzeit nur in großen spezialisierten Zentren und Labors eingesetzt.

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