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Konfokale Lebensdauer-Hornhautmikroskopie
Zuletzt überprüft: 06.07.2025
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Die konfokale Mikroskopie der Hornhaut ist eine der modernen Forschungsmethoden; sie ermöglicht eine intravitale Überwachung der Hornhaut mit Gewebevisualisierung auf zellulärer und mikrostruktureller Ebene.
Dank der originellen Konstruktion des Mikroskops und seiner hohen Auflösung ermöglicht diese Methode die Visualisierung von lebendem Hornhautgewebe, die Messung der Dicke jeder seiner Schichten und die Beurteilung des Ausmaßes morphologischer Störungen.
Der Zweck der konfokalen Hornhautmikroskopie
Zur Charakterisierung der morphologischen Veränderungen der Hornhaut, die bei verschiedenen entzündlichen und dystrophischen Erkrankungen sowie als Folge chirurgischer Eingriffe und der Einwirkung von CL auftreten.
Morphologische Untersuchungsdaten sind erforderlich, um die Schwere des pathologischen Prozesses und die Wirksamkeit der Behandlung zu beurteilen und die Taktik der Patientenbehandlung festzulegen.
Hinweise für das Verfahren
- Entzündliche Erkrankungen der Hornhaut ( Keratitis ).
- Dystrophische Erkrankungen der Hornhaut ( Keratokonus, Fuchs-Dystrophie usw.).
- Trockenes Auge-Syndrom.
- Zustände nach chirurgischen Eingriffen an der Hornhaut (perforierende Hornhauttransplantation, keratorefraktive Operationen).
- Erkrankungen im Zusammenhang mit dem Tragen von Kontaktlinsen.
Technik Konfokale Mikroskopie der Hornhaut
Die Untersuchung wird mit einem konfokalen Mikroskop ConfoScan 4 (Nider) mit 500-facher Vergrößerung durchgeführt. Das Gerät ermöglicht die Untersuchung der Hornhaut in ihrer gesamten Dicke.
Die Größe des untersuchten Bereichs beträgt 440 × 330 μm, die Dicke der Scanschicht beträgt 5 μm. Die Linse mit einem Tropfen Gel wird bis zum Kontakt mit der Hornhaut herangeführt und so positioniert, dass die Schichtdicke der Immersionsflüssigkeit 2 mm beträgt. Das Design des Geräts ermöglicht die Untersuchung der Hornhaut im zentralen Bereich und in den parazentralen Bereichen.
Normale Leistung
Normales morphologisches Bild der Hornhaut
Das vordere Epithel besteht aus 5–6 Zellschichten. Die durchschnittliche Dicke des gesamten Epithels beträgt ca. 50 µm. Entsprechend der morphologischen Struktur unterscheidet man (von innen nach außen) folgende Schichten: basale, ahlenförmige Zellen und oberflächliche.
- Die innerste (basale) Schicht besteht aus kleinen, dichten, zylindrischen Zellen ohne sichtbaren Zellkern. Die Grenzen der Basalzellen sind klar und hell.
- Die mittlere Schicht besteht aus zwei bis drei Lagen stacheliger (geflügelter) Zellen mit tiefen Einstülpungen, in die die Auswüchse benachbarter Zellen eingebettet sind. Mikroskopisch sind die Zellgrenzen recht deutlich erkennbar, die Zellkerne können undefiniert oder unklar sein.
- Die oberflächliche Schicht des Epithels besteht aus einer oder zwei Schichten polygonaler Zellen mit klaren Grenzen und homogener Dichte. Die Kerne sind in der Regel heller als das Zytoplasma, in dem sich auch ein perinukleärer dunkler Ring abzeichnet.
Unter den Zellen der oberflächlichen Schicht werden dunkle und helle Zellen unterschieden. Eine erhöhte Reflektivität der Epithelzellen weist auf eine Verringerung ihrer Stoffwechselrate und ihre beginnende Abschuppung hin.
Die Bowman-Membran ist eine transparente Struktur, die kein Licht reflektiert. Daher ist es normalerweise unmöglich, sie mit konfokaler Mikroskopie sichtbar zu machen.
Der subbasale Nervenplexus befindet sich unter der Bowman-Membran. Normalerweise erscheinen Nervenfasern als helle, parallel verlaufende Streifen auf dunklem Hintergrund, die sich berühren. Die Reflektivität (Reflexion) kann entlang der Faser ungleichmäßig sein.
Das Hornhautstroma nimmt 80 bis 90 % der Hornhautdicke ein und besteht aus zellulären und extrazellulären Komponenten. Die wichtigsten zellulären Elemente des Stromas sind Keratozyten; sie machen etwa 5 % des Volumens aus.
Ein typisches mikroskopisches Bild des Stromas umfasst mehrere helle, unregelmäßig ovale Körper (Keratozytenkerne), die in der Dicke einer transparenten dunkelgrauen oder schwarzen Matrix liegen. Normalerweise ist die Visualisierung extrazellulärer Strukturen aufgrund ihrer Transparenz nicht möglich. Das Stroma kann bedingt in Unterschichten unterteilt werden: anterior (befindet sich direkt unter der Bowman-Membran und macht 10 % der Stromadicke aus), anterior-mittlere, mittlere und posteriore.
Die durchschnittliche Keratozytendichte ist im vorderen Stroma höher und nimmt zu den hinteren Schichten hin allmählich ab. Die Dichte der vorderen Stromazellen ist fast doppelt so hoch wie die der hinteren Stromazellen (wenn die Dichte der vorderen Stromazellen mit 100 % angenommen wird, beträgt die Dichte der hinteren Stromazellen etwa 53,7 %). Im vorderen Stroma haben die Keratozytenkerne eine abgerundete, bohnenförmige Form, während sie im hinteren Stroma oval und länglicher sind.
Keratozytenkerne können in ihrer Helligkeit variieren. Die unterschiedliche Fähigkeit, Licht zu reflektieren, hängt von ihrem Stoffwechselzustand ab. Hellere Zellen gelten als aktivierte Keratozyten („Stresszellen“), deren Aktivität auf die Aufrechterhaltung der inneren Homöostase der Hornhaut abzielt. Im Normal- und Gesichtsfeld finden sich einzelne aktivierte Zellen.
Nervenfasern im vorderen Hornhautstroma werden als helle, homogene Bänder dargestellt, die häufig Gabelungen bilden.
Die Descemet-Membran ist normalerweise transparent und kann durch konfokale Mikroskopie nicht sichtbar gemacht werden.
Das hintere Epithel ist eine Monoschicht aus hexagonalen oder polygonalen flachen Zellen mit einer gleichmäßig hellen Oberfläche vor einem Hintergrund klarer, dunkler Interzellulargrenzen.
Das Gerät kann die Zelldichte, ihre Fläche und ihren Variabilitätskoeffizienten manuell oder automatisch berechnen.
Krankhafte Veränderungen in der Struktur der Hornhaut
Keratokonus ist durch signifikante Veränderungen im vorderen Epithel und Stroma der Hornhaut gekennzeichnet.
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