Immunhistochemische Marker in der Diagnostik von Präkanzerosen der Mundschleimhaut und des roten Lippenrandes

Die rechtzeitige und effektive Diagnose von neoplastischen Läsionen der Mundschleimhaut (CRS) und des roten Lippenrands (CCG) bleibt ein ernstes Problem der Onkostomatologie. Das Plattenepithelkarzinom der Mundhöhle nimmt den sechsten Platz in der Welt in der Häufigkeit unter den bösartigen Geschwülsten aller Lokalisationen ein. In der Russischen Föderation beträgt die Inzidenz von malignen Neoplasien der Mundhöhle 2-4% der Gesamtzahl der bösartigen Tumoren des Menschen.

In den letzten Jahren hat die Struktur von Erkrankungen der Mundschleimhaut wesentliche Veränderungen erfahren, insbesondere eine Zunahme des Anteils an Präkanzerosen. In dieser Hinsicht bleibt die effektive nicht-invasive Erkennung von Malignitätszeichen eine dringende Aufgabe der Zahnmedizin.

Trotz der scheinbaren Einfachheit des klinischen Bildgebung Prädiktor für Veränderungen der Mundschleimhaut und CGC in Verbindung mit externer Lokalisierung, Bestimmung nosologischen Präkanzerose, basierend nur auf dem Eindruck durch Inspektion und Palpation, führen häufig zu Fehldiagnosen wurden Grad der Verhornung oder Geschwüre sogar markornyh Elemente unterschiedlicher Niederlage macht sie trudnodifferentsiruemymi. Besonders schwierig frühe Diagnose von malignen Erkrankungen, seit ihrer klinischen Symptome erscheinen etwas später trat tatsächlich maligne Transformation.

Die Forschung von V.P. Kharchenkoet al. Es wird gezeigt, dass mehr als 2/3 der Patienten zum Zeitpunkt der Behandlung in der medizinischen Einrichtung und der Feststellung der Diagnose III-IV-Stadien der Krankheit haben. Einer der Gründe für eine späte Behandlung ist das "Verschwimmen" des klinischen Bildes in den Anfangsstadien der Krankheit. Darüber hinaus wurde nachgewiesen, dass organisatorische und methodische Arbeiten durchgeführt und der Kenntnisstand von Zahnärzten über die frühen klinischen Manifestationen von Präkanzerosen der Mundschleimhaut erhöht werden muss. Die durchgeführten Tests zeigten, dass nur 42,8% der Zahnärzte die frühen Manifestationen von Mundkrebs unterscheiden, 4,2% der Befragten können primäre diagnostische Maßnahmen zum Nachweis von Krebs dieser Lokalisation richtig durchführen.

Der Anteil der unheilbaren Krebsformen der Mundschleimhaut aufgrund von diagnostischen Fehlern liegt laut verschiedenen Autoren bei 58,4-70%. Die Situation wird durch die ungelösten Probleme der klinischen Diagnose der Präkanzerose, insbesondere die Schwierigkeit, das Auftreten von Malignität zu differenzieren, sowie das Problem der Wahl einer Methode zur Behandlung einer Prätumorerkrankung kompliziert. Es gibt keine absoluten und relativen Indikationen für die Biopsie, insbesondere in den Stadien der konservativen Behandlung. Bis heute gibt es in der Literatur kein einziges Beispiel für das diagnostische Kriterium des klinischen Niveaus, auf das sich ein Zahnarzt bei der Auswahl einer geeigneten Methode zur Behandlung einer bestimmten Prä-Tumorerkrankung beziehen könnte.

Auflösung von diagnostischen Schwierigkeiten sehen die meisten Autoren in diagnostischen Hilfsverfahren (Zytologie, Cheilostomatoskopie, Biomikroskopie, optische Kohärenztomographie). Diese Methoden sind jedoch eher subjektiv, da sie nur den beschreibenden Charakter der qualitativen Veränderungen in den betroffenen Geweben tragen. Eine Möglichkeit zur Quantifizierung morphologischer Veränderungen besteht in der Bestimmung von immunhistochemischen Markern.

Die Einführung moderner morphologischer Methoden zur Tumorverifikation in die moderne Praxis hat die Qualität der Diagnose und Behandlung von malignen Tumoren signifikant verbessert. Methodische Möglichkeiten der modernen molekularen Onkologie verbreiterte derzeit mit immunhistochemischen Untersuchungen können nicht nur die histologische Diagnose des Tumors bestimmen, sondern auch in Bezug auf die Aggressivität und die Prognose in Bezug auf Präkanzerosen und Krebs es morphofunktionelle Eigenschaften geben, bereits entwickelt hat.

Nach modernen Vorstellungen ist die Grundlage der malignen Transformation von Zellen die Aktivierung einzelner oder mehrerer zellulärer Onkogene oder Suppressor-Gene. Es wird bei 30% der Krebserkrankungen von Menschen beobachtet und kann in vielen Fällen immunhistochemisch nachgewiesen werden. Onkogene ras p21, HER2 / neu, bcl-2 und Suppressor-Gene p53 und Rb in verschiedenen Tumoren wurden untersucht. Einige der aufgeführten Onkogene (und Suppressorgene) sind unabhängige prognostische und prädiktive Zeichen.

Das Epithel der Mundschleimhaut ist der Locus praedifectionis der Bildung von Krebstumoren. Externe Faktoren (traumatische Okklusion Websites, die scharfen Kanten von Restaurationen insolvent orthopädisches Design, irrational individuelle Mundhygiene, entzündliche und destruktive parodontale Läsionen) zusammen mit genetischen (hereditäre) Faktoren können bei der Entstehung von Krebs dieser Lokalisation eine Rolle spielen. Bei der Entwicklung von Plattenepithelkarzinomen der Mundschleimhaut können Schäden an den Mechanismen beteiligt sein, die die Prozesse der epithelialen Hyperplasie und der Plattenepithelmetaplasie steuern.

Morphologische Merkmale des Mundschleimhaut Epithels bei Malignität assoziiert mit einer Veränderung in einem Satz von Differenzierungs (Phänotyp Cytokeratin primär Epithelschicht) -Marker CEA-Expression sowie Proliferationsmarker Ki - 67.

P53 - Tumorgen - Suppressor-Proteinprodukt, das ein Kerntranskriptionsfaktor mit vielen Funktionen, einschließlich dem Durchgang von Zellen auf Zellzyklus und die Induktion der Apoptose zu blockieren. Das p53-Protein wird in allen Körperzellen exprimiert. In Abwesenheit von Schäden am genetischen Gerät befindet sich das p53-Protein in einem inaktiven Zustand, und wenn DNA-Schäden auftreten, wird die DNA aktiviert. Die Aktivierung besteht darin, den Erwerb der Fähigkeit, an DNA zu binden und die Transkription von Genen zu aktivieren, die eine regulatorische Region einer Nucleotidsequenz enthält, das p53-Response-Element bezeichnet wird. Die Mutation von p53 in Zellen etwa 50% der Krebserkrankungen auftritt, führt zu der Proteinsynthese mit dem Verlust seiner Funktionen, aber eine hohe Stabilität und Akkumulieren in dem Kern aufweist, die immunhistochemisch in einer bestimmten Kernfärbung ausgedrückt.

Der "wilde" Typ des wt-53-Oncosuppressorgens und das von ihm kodierte p53-Protein spielen eine zentrale Rolle bei der Entwicklung von Apoptose. Wenn DNA beschädigt ist, tritt eine Expression des wt53-Gens und des entsprechenden Proteins auf. Letzteres blockiert den Zellzyklus in der G1-S-Phase und hemmt dadurch die weitere Replikation der beschädigten DNA, die in der S-Phase synthetisiert wird, und schafft Bedingungen für die Entfernung der beschädigten Stelle und die Reparatur ihrer veränderten Stelle. Wenn eine Reparatur stattfindet, teilt sich die Zelle weiter und erzeugt gesunde Zellen. Wenn Reparatur jedoch nicht stattfindet, sind andere Mechanismen eingeschlossen, die die Zerstörung einer solchen Zelle mit beschädigter (mutagener) DNA sicherstellen, d.h. Das genetische Programm des Zelltods entwickelt sich - Apoptose.
In den letzten Jahren wurde vorgeschlagen, dass der p53-Status ein entscheidender Faktor sein kann, der die Empfindlichkeit eines Tumors gegenüber Chemo- und Strahlentherapie bestimmt. Bestätigung dieser Annahme sind zahlreiche Studien, die beweisen, dass mutiertes p53 ein Faktor der schlechten Prognose und der Ineffektivität der adjuvanten Therapie für eine Vielzahl von Neoplasmen der Mundschleimhaut ist.

Marker der Proliferation sind auch ein sehr aussagekräftiger diagnostischer Wert bei der Vorhersage des Verlaufs maligner Tumoren. Proliferative Aktivität ist ein führender Faktor sowohl im Mechanismus der malignen Transformation von Zellen als auch im biologischen Verhalten von bereits entstehenden Tumoren. Ein vielversprechender Marker der proliferativen Aktivität ist das Ki-67-Antigen, das praktisch in allen Phasen des Zellzyklus exprimiert wird und dementsprechend die Größe des proliferativen Pools widerspiegelt. Das für Ki-67 kodierende Gen befindet sich am langen Arm des 10-Chromosoms. Ki-67 bezieht sich auf regulatorische Proteine. Ihr Erscheinen fällt mit dem Eintritt der Zelle in die Mitose zusammen, was es ermöglicht, sie als universellen Marker der Proliferation bei der Beurteilung des Wachstums bösartiger Tumore zu verwenden.

Eine Anzahl von Studien wurde durchgeführt, die den diagnostischen Wert von immunhistochemischen Markern bei der Vorhersage des Verlaufs von Präkanzerosen der Mundschleimhaut und der roten Lippengrenze untersuchen. Murti PR et al. Untersuchten die Expression von p53 mit rotem SSRI-Flatrat. Als die immunhistochemische Methode bestimmt wurde, konnte die Expression von p53 den malignen Status der Präkanzerose der Mundschleimhaut nicht aufdecken. Die Autoren schlugen vor, dass der Peak der Überexpression von p53 dem Zeitpunkt der Transformation der Präkanzerose in Krebs nahe kommt und nicht als ein früher Marker für die Vorhersage der Malignität der Präkanzerose der Mundschleimhaut verwendet werden kann. Andere Forscher fanden heraus, dass das menschliche Gen TP53 mindestens neun verschiedene Isoformen kodiert. Ein anderes Mitglied der p53-Familie, p63, umfasst 6 verschiedene Isoformen und spielt eine Schlüsselrolle bei der Entwicklung der Mundschleimhaut, der Speicheldrüsen, der Zähne und der Haut. Es wurde vorgeschlagen, dass p63 mit der Entwicklung von Plattenepithelkarzinomen des Kopfes und Halses verbunden ist. Es wurden jedoch keine statistisch signifikanten Veränderungen in der Expression neuer Isoformen von p53 und p63 in der Präkanzerose von SSRI im Vergleich zu unmodifiziertem Gewebe beobachtet. Studien von De Sousa FA bestätigten die prognostische Bedeutung des p53-Markers bei der Bestimmung des Potentials einer malignen Transformation der Präkanzerose der Mundschleimhaut. Zur gleichen Zeit glauben einige Autoren, dass p53 nicht als einzelner Marker für die Vorhersage der Entwicklung von Krebs verwendet werden kann.

Ebenso versprechendsten prognostische immunhistochemische Detektionsebene wird in der untersuchten Gewebeproben podoplanina dargestellt - integrales Membran mucoprotein als unverändert und die veränderten inflammatorischer und neoplastischen Endothel der lymphatischen Kapillaren exprimiert wird. Forscher einen statistisch signifikanten Beziehung Ausdruck podoplanina gefunden hatten iABCG2 (ATP-bindende Protein Untergruppe G2) mit dem Risiko einer malignen Transformation von Lichen ruber (das Risiko war signifikant höher mit Koexpression podoplanina und ABCG2, als ohne Koexpression podoplanina und ABCG2) und folgerte, dass podoplanin und ABCG2 können als Biomarker für die Beurteilung des Risikos einer malignen Transformation mit präkanzerösen Läsionen verwendet werden RBCU

Forschungen ausländischer Wissenschaftler bestätigten die diagnostische Bedeutung der Fas / FasL-Expression als Biomarker der Krebsentstehung. Fas ist ein Typ-I-Glykoprotein-Transmembran (Synonyme APO-I, CD95) und induziert Apoptose in Zellen, nach Wechselwirkung mit Fas-Ligand (FasL) oder agonistischen monoklonalen Antikörper gegen Fas.

Zur gleichen Zeit ist bekannt, dass Fas in praktisch allen Arten von Geweben exprimiert wird. Erhöhte Fas-Expression wird in den Nieren, Leber, Herz und Thymus beobachtet. Darüber hinaus wird dieser Rezeptor auf vielen Tumoren sowie in virusinfizierten Zellen exprimiert. Der Grund für die Resistenz verschiedener Zelltypen gegenüber Fas-abhängiger Apoptose kann eine erhöhte Produktion von löslichem Fas durch diese Zellen sein. Soluble Fas ist ein Produkt des alternativen Spleißens und kann Apoptose hemmen, die durch agonistische monoklonale Antikörper gegen Fas oder FasL induziert wird.

So durch mehrdeutig Interpretation der Ergebnisse der Forschung von verschiedenen Autoren aus führt zu dem Schluss, dass in der gegenwärtigen Phase der molekularen Onkologie prospektiv immunhistochemischen Marker in Kombination verwenden, um mit anderen Methoden der Diagnose und Prognose von Präkanzerosen der Mundschleimhaut.

Von besonderer Relevanz ist das Problem der Einstufung von immunhistochemischen Markern für diagnostische Signifikanz. Wir glauben, dass sie in der Reihenfolge abnehmender Wichtigkeit in der folgenden Reihenfolge angeordnet werden können:

1. Immunhistochemische Marker von hoher diagnostischer Bedeutung: Subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Immunhistochemische Marker von mittlerem diagnostischen Stellenwert: Bax, MMP-9;
3. Vielversprechende immunhistochemische Marker, deren diagnostische Bedeutung weitere Studien erfordert: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Immunhistochemische Marker, deren diagnostische Bedeutung den Verlauf von Präkanzerosen voraussagen lässt, sind nicht belegt: p53, p63.

Basierend auf dieser Analyse von Literaturdaten kann geschlossen werden, dass die Bestimmung der immunhistochemischen Marker sollten nicht als die einzige Methode zur Vorhersage der Verlauf der präkanzerösen Läsionen der Mundschleimhaut betrachtet werden und das Risiko einer malignen Transformation zu identifizieren, aber dennoch hat das Verfahren einen hohen diagnostischen Wert in Kombination mit anderen Methoden zur Vorhersage des Verlaufs von Präkanzerosen.

Senior Researcher Kuznetsova Roza Gilewna. Immunhistochemische Marker bei der Diagnose von präkanzerösen Läsionen der Mundschleimhaut und der roten Lippengrenze // Praktische Medizin. 8 (64) Dezember 2012 / Band 1

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