Hepatitis C PCR

Normalerweise ist HCV im Material nicht vorhanden.

Im Gegensatz zu serologischen Methoden zur Diagnose von Virushepatitis C, die Antikörper gegen HCV nachweisen, ermöglicht die PCR den direkten Nachweis von HCV-RNA und die Quantifizierung ihrer Konzentration im Testmaterial. Der Test ist spezifitätsspezifisch und hochsensitiv: Zehn HCV-RNA-Moleküle im Testmaterial reichen für den Nachweis aus. Der Nachweis von Antikörpern gegen HCV bestätigt lediglich die tatsächliche Infektion des Patienten, erlaubt jedoch keine Beurteilung der Aktivität des Infektionsprozesses (Virusreplikation) und der Krankheitsprognose. Darüber hinaus werden Antikörper gegen HCV sowohl im Blut von Patienten mit akuter und chronischer Hepatitis als auch bei erkrankten und genesenen Patienten nachgewiesen. Oftmals treten Antikörper im Blut erst mehrere Monate nach Ausbruch der Krankheit auf, was die Diagnose erschwert. Der Nachweis von HCV im Blut mittels PCR ist eine aussagekräftigere Diagnosemethode. Der Nachweis von HCV-RNA mittels PCR weist auf eine Virämie hin, ermöglicht die Beurteilung der Virusreplikation im Körper und dient als eines der Kriterien für die Wirksamkeit der antiviralen Therapie. Der Nachweis von HCV-RNA mittels PCR in frühen Stadien einer Virusinfektion, bei völliger Abwesenheit serologischer Marker, kann als frühester Infektionsnachweis dienen. Der isolierte Nachweis von HCV-RNA in völliger Abwesenheit anderer serologischer Marker kann jedoch ein falsch-positives PCR-Ergebnis nicht vollständig ausschließen. In solchen Fällen ist eine umfassende Auswertung klinischer, biochemischer und morphologischer Untersuchungen mit wiederholter Bestätigung des Vorliegens einer Infektion mittels PCR erforderlich.

Der Einsatz der PCR-Methode bei Patienten mit chronischer Virushepatitis C ist von großer Bedeutung, da bei den meisten Patienten keine Korrelation zwischen der Virusreplikation und der Aktivität der Leberenzyme besteht. In solchen Fällen ermöglicht nur die PCR eine Beurteilung der Virusreplikation, insbesondere wenn das Endergebnis quantitativ ausgedrückt wird. In den meisten Fällen tritt das Verschwinden der HCV-RNA aus dem Blutserum später ein als die Normalisierung der Leberenzyme, sodass deren Normalisierung nicht als Grundlage für das Absetzen der antiviralen Behandlung dienen kann.

Es ist praktisch wichtig, nicht nur Blutserum, sondern auch Lymphozyten und Hepatobiopsieproben mittels PCR auf HCV-RNA zu untersuchen. Viren lassen sich im Lebergewebe 2-3-mal häufiger nachweisen als im Blutserum. Bei der Auswertung der Ergebnisse eines Blutserumtests auf HCV-RNA ist zu beachten, dass die Virämie schwanken kann (ebenso wie Veränderungen der Enzymaktivität). Daher kann nach einem positiven PCR-Testergebnis ein negatives Ergebnis auftreten und umgekehrt. In solchen Fällen ist es ratsam, Hepatobiopsieproben zu untersuchen, um etwaige Zweifel auszuräumen.

Der Nachweis von HCV-RNA in Material mittels PCR dient folgenden Zwecken:

• Klärung fragwürdiger serologischer Testergebnisse;
• Abgrenzung der Virushepatitis C von anderen Hepatitisformen;
• Identifizierung des akuten Krankheitsstadiums im Vergleich zur vorherigen Infektion oder zum vorherigen Kontakt; Bestimmung des Infektionsstadiums von Neugeborenen von HCV-seropositiven Müttern;
• Überwachung der Wirksamkeit der antiviralen Behandlung.

Patienten mit Verdacht auf Virushepatitis C:

• Spender;
• Personen mit Risikofaktoren;
• Personen mit erhöhter ALT-Aktivität;
• Patienten mit akuter Hepatitis

Alle oben genannten Besonderheiten der Ergebnisauswertung und Vorgehensweisen bei der HCV-Diagnostik mittels PCR gelten auch für andere Infektionen.

Die PCR-Methode ermöglicht nicht nur den Nachweis von HCV-RNA im untersuchten Material, sondern auch die Bestimmung seines Genotyps. Die Bestimmung des Virusgenotyps ist von großer Bedeutung für die Auswahl von Patienten mit chronischer Virushepatitis C zur Behandlung mit Interferon-alpha und Ribavirin. Laborindikationen für die Behandlung der chronischen Virushepatitis C mit Interferon-alpha sind wie folgt:

• erhöhte Transaminaseaktivität;
• Vorhandensein von HCV-RNA im Blut;
• HCV-Genotyp 1;
• hohe Virämie im Blut (mehr als 8×10 ⁵ Kopien/ml).

Derzeit ist es möglich, den HCV-RNA-Gehalt im Blutserum mithilfe der PCR-Methode quantitativ zu bestimmen, was für die Überwachung der Interferon-Alpha-Behandlung von großer Bedeutung ist. Der Virämiegrad wird wie folgt beurteilt: bei einem HCV-RNA-Gehalt von 10 ² bis 10 ⁴ Kopien/ml – schwach; von 10 ⁵ bis 10 ⁷ Kopien/ml – durchschnittlich, über 10 ⁸ Kopien/ml – hoch. Bei wirksamer Behandlung sinkt der Virämiegrad.

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