Einschränkungen, Gefahren und Komplikationen der Zelltransplantation

Kunststoff-regenerative Medizin wird in der Klinik und toti- Eigenschaften pluripotenten embryonalen Stamm- und Progenitorzellen die Erkenntnis zugrunde, in vitro und in vivo ermöglicht eine vorbestimmte Zelllinien repopulating beschädigtem Gewebe und Organen eines menschlichen Patienten zu schaffen.

Die reale Möglichkeit, die Stammzellen der Embryo- und Stammzellen von definitiven Geweben (die sogenannten adulten Stammzellen) eines Menschen für therapeutische Zwecke zu nutzen, ist nicht mehr zweifelhaft. Experten der Nationalen und Medizinischen Akademien der Vereinigten Staaten (USA) empfehlen jedoch, die Eigenschaften von Stammzellen in Experimenten genauer zu untersuchen über adäquate biologische Modelle und objektiv bewerten alle Folgen der Transplantation, und nur dann verwenden Sie Stammzellen in der Klinik.

Es ist erwiesen, dass Stammzellen Teil der Gewebederivate aller drei embryonalen Blättchen sind. Die Stammzellen werden in der Netzhaut, Hornhaut, der Haut, der Epidermis, Knochenmark und peripherem Blut in den Gefäßen, die Pulpa des Zahns, der Niere, das Epithel des Verdauungstraktes, der Bauchspeicheldrüse und der Leber. Mit Hilfe moderner Methoden wird nachgewiesen, dass neurale Stammzellen im adulten Gehirn und Rückenmark lokalisiert sind. Diese sensationellen Erkenntnisse haben besondere Aufmerksamkeit von Wissenschaftlern und den Medien angezogen, wie Neuronen im Gehirn ein klassisches Beispiel für eine statische Zellpopulation war, die nicht gestellt werden können. Beide frühen und späten Perioden der Ontogenese aufgrund neuralen Stammzellen in den menschlichen und tierischen Gehirn erzeugt Neuronen, Astrozyten und Oligodendrozyten (Stammzellen: wissenschaftliche Fortschritte und zukünftige Forschungsrichtungen Nat Inst, of Health USA ..).

Unter normalen Bedingungen erscheint die Plastizität von Stammzellen von definitivem Gewebe jedoch nicht. Um das plastische Potenzial von Stammzellen von definitivem Gewebe zu realisieren, müssen sie isoliert und anschließend in Medien mit Zytokinen (LIF, EGF, FGF) kultiviert werden. Darüber hinaus überleben Stammzellderivate nur, wenn sie in den Körper eines Tieres mit einem geschwächten Immunsystem (γ-Bestrahlung, Zytostatika, Busulfan usw.) transplantiert werden. Bis heute gab es keine überzeugenden Beweise für die Plastizität von Stammzellen bei Tieren, die nicht bestrahlt wurden oder anderweitig einer tiefen Immunsuppression ausgesetzt waren.

Unter solchen Umständen werden gefährliche Potenz PGCs manifestiert in erster Linie in ihrem ektopischen Transplantationsbereich - subkutane Injektion ESK immundefizienten Mäuse an der Injektionsstelle gebildet Teratocarcinoma. Außerdem ist die Häufigkeit von Chromosomenanomalien bei der Entwicklung des menschlichen Embryos höher als bei der Embryogenese bei Tieren. Im Blastozystenstadium nur 20-25% der menschlichen Embryonen werden von Zellen mit normalem Karyotyp einer zusammengesetzt, und in der überwiegenden Mehrzahl der frühen menschlichen Embryonen nach der Befruchtung in vitro erhalten werden, detektiert chromosomalen mosaicism chaotisch und sehr häufig numerische und strukturelle Aberrationen.

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Vorteilhafte Wirkung von Stammzellen

Vorläufige Ergebnisse von klinischen Studien bestätigen die positive Wirkung von Stammzellen auf den Patienten, aber bisher gibt es keine Informationen über die langfristigen Folgen der Zelltransplantation. In der Literatur wird zunächst durch Berichte über positive Ergebnisse der Transplantation von Knochenmark-Fragmenten von Embryonen bei der Parkinson-Krankheit dominierte, aber dann begann, die Daten zu leugnen effektive therapeutische Wirkung von embryonalen oder fötalen Nervengeweben in das Gehirn von Patienten transplantierten erscheinen.

In der Mitte des Jahrhunderts XX die Wiederherstellung der Hämatopoese wurde zum ersten Mal in letal bestrahlten Tieren nach intravenöser Gabe von Knochenmarkzellen entdeckt, und im Jahr 1969 durchgeführt, der amerikanische Forscher D. Thomas den ersten Transplantation Mann Knochenmark. Das fehlende Wissen über die Mechanismen der immunologischen Inkompatibilität der Knochenmarkzellen des Spenders und Empfängers zu dieser Zeit verursachte eine hohe Letalität aufgrund häufiger Nicht-Pfropfung und Entwicklung der "Graft-versus-Host" -Reaktion. Die Entdeckung des Haupthistokompatibilitätskomplexes, die zu erhöhen, ist es von Human-Leukozyten-Antigen (HbA) und Verbesserung von Verfahren zur Eingabe möglich signifikant die Überlebensrate nach einer Knochenmarktransplantation zusammengesetzt ist, die in der Onkologie und Hämatologie zu weit verbreitet diese Methode der Behandlung führten. Nach einem Jahrzehnt wurde die erste Transplantation von hämatopoetischen Stammzellen (HSC) durchgeführt, die aus peripherem Blut mit Hilfe von Leukapherese erhalten wurden. Im Jahr 1988 in Frankreich für die Behandlung eines Kind mit Fanconi-Anämie als Quelle von HSCs es erstem Nabelschnurblut, und Ende 2000 in der Presse verwendet wurde, begann über die Fähigkeit der HSZ erscheint in Zellen von verschiedenen Gewebetypen zu unterscheiden, die möglicherweise den Umfang ihrer klinischen Anwendung erweitert. Es stellte sich jedoch heraus, dass das Material für die Transplantation zusammen mit GSK eine signifikante Anzahl von nicht-hämatopoetischen Zellen enthält, die in ihrer Natur und ihren Eigenschaften verschieden sind. In diesem Zusammenhang werden Verfahren zur Reinigung des Transplantats und Kriterien zur Beurteilung seiner Zellreinheit entwickelt. Insbesondere wird eine positive Immunosektion von CD34 + -Zellen verwendet, die es ermöglicht, HSC mit Hilfe von monoklonalen Antikörpern zu isolieren.

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Komplikationen der Stammzelltherapie

Komplikationen der Knochenmarktransplantation sind meist hämatologisch und mit einer längeren iatrogenen Panzytopenie assoziiert. Die häufigsten Infektionen sind Anämie, Anämie und Blutungen. In dieser Hinsicht ist es äußerst wichtig, die optimale Art der Probenahme, Verarbeitung und Lagerung des Knochenmarks für eine maximale Konservierung von Stammzellen zu wählen, die eine schnelle und stabile Wiederherstellung der Hämatopoese gewährleisten. Bei der Charakterisierung eines Transplantats wird derzeit die Bewertung der folgenden Parameter akzeptiert: Anzahl der mononukleären und / oder kernhaltigen Zellen, koloniebildende Einheiten und Gehalt an SB34-positiven Zellen. Leider liefern diese Indikatoren nur eine indirekte Schätzung der tatsächlichen hämatopoetischen Fähigkeit der Stammzelltransplantationspopulation. Für heute gibt es absolut präzise Parameter für die Bestimmung der Hinlänglichkeit des Transplantats für die langfristige Wiederherstellung der Hämopoese bei Patienten auch bei der autologen Knochenmarktransplantation. Die Entwicklung gemeinsamer Kriterien ist aufgrund fehlender strenger Verarbeitungsstandards, Kryokonservierung und Pfropftests äußerst schwierig. Darüber hinaus ist es notwendig, die Vielzahl von Faktoren zu berücksichtigen, die die Parameter der erfolgreichen Wiederherstellung der Hämatopoese bei jedem einzelnen Patienten beeinflussen. In autologer Knochenmarktransplantation wichtigsten davon ist die Anzahl der Vortherapien, insbesondere Konditionierung, eine Periode der Krankheit, die im Knochenmark Sammelsystem Anwendung Kolonie-stimulierenden Faktoren in Posttransplantationsphase erzeugt wird. Darüber hinaus sollte nicht vergessen werden, dass eine Chemotherapie, der eine fetale Transplantation vorausgeht, negative Auswirkungen auf Knochenmarkstammzellen haben kann.

Die Inzidenz schwerer toxischer Komplikationen nimmt bei allogener Knochenmarktransplantation signifikant zu. In diesem Zusammenhang sind statistische Daten zur Transplantation von allogenem Knochenmark in die Thalassämie von Interesse. In den Berichten der Europäischen Knochenmarktransplantationsgruppe wurden etwa 800 Knochenmarktransplantationen bei Patienten mit großer Thalassämie aufgezeichnet. Allogene Transplantation in Thalassämie in den meisten Fällen von HLA-identischen Geschwistern durchgeführt, die mit schweren Komplikationen und einem höheren Sterblichkeit bei der Transplantation von Stammzellen Material teilweise kompatibel Zusammenhang zugeordnet ist oder nicht verwandte Spender abgestimmt. Um das Risiko tödlicher infektiöser Komplikationen zu minimieren, werden die Patienten in isolierte aseptische Boxen mit einem laminaren Luftstrom gesetzt und erhalten eine niedrig- oder abakterielle Diät. Zur bakteriellen Dekontamination des Darms verschreiben per os nicht-resorptive Formen von Antibiotika, Antimykotika. Um intravenöse Amphotericin B. Vermeidung von systemischen Infektionen fixierten Amikacin und Ceftazidim zu verhindern, die am Tag vor der Transplantation bezeichnen, während der Behandlung weiterhin Patienten zu entladen. Alle Blutpräparate vor der Bestrahlung werden mit einer Dosis von 30 Gy bestrahlt. Parenterale Ernährung während der Transplantation ist eine Voraussetzung und beginnt sofort mit der Begrenzung der Nahrungsaufnahme auf natürlichem Wege.

Eine Reihe von Komplikationen sind mit einer hohen Toxizität von Immunsuppressiva verbunden, die häufig zu Übelkeit, Erbrechen und Mukositis, Nierenschäden und interstitieller Pneumonie führen. Eine der schwerwiegendsten Komplikationen der Chemotherapie ist die veno-okklusive Lebererkrankung, die in der frühen Post-Transplantationszeit zum Tod führt. Zu den Risikofaktoren für eine Venenthrombose im Pfortadersystem der Leber gehören das Alter der Patienten, das Vorhandensein von Hepatitis und Leberfibrose sowie eine immunsuppressive Therapie nach Knochenmarktransplantation. Veno-okklusive Krankheit ist besonders gefährlich in Thalassämie, die von Hämosiderose der Leber, Hepatitis und Fibrose begleitet ist - häufige Satelliten der Transfusionstherapie. Venöse Thrombose des Portal-Systems der Leber entwickelt mich innerhalb von 1-2 Wochen nach der Transplantation und wird durch einen schnellen Anstieg des Blut Bilirubin und Transaminasen, progressiven Hepatomegalie, Aszites, Enzephalopathie, und Schmerzen im Oberbauch aus. Histologisch Autopsiematerial in Endothelschädigung, subendothelialen Hämorrhagie definiert, Läsionen tsentrolobulyarnyh Hepatozyten, thrombotische Obstruktion hepatische Venolen und die zentrale Vene. Bei Patienten mit Thalassämie wurden Fälle von tödlichem Herzstillstand in Verbindung mit toxischen Wirkungen von Zytostatika beschrieben.

In Vorbereitung auf die Transplantation verursachen Cyclophosphamid und Busulfan häufig toxische hämorrhagische Zystitis mit pathologischen Veränderungen in Uroepithelzellen. Die Verwendung von Cyclosporin A bei der Knochenmarktransplantation ist häufig von Wirkungen der Nephro- und Neurotoxizität, des Hypertonie-Syndroms, der Flüssigkeitsretention im Körper und der Zytolyse von Hepatozyten begleitet. Die Verletzung der sexuellen und reproduktiven Funktion wird häufiger bei Frauen beobachtet. Bei kleinen Kindern nach der Transplantation leidet die Pubertätsentwicklung gewöhnlich nicht, aber bei älteren Kindern kann die Pathologie der Entwicklung der Genitalsphäre sehr ernst sein - bis zur Sterilität. Komplikationen, die direkt mit dem Transplantat selbst in Zusammenhang stehen, umfassen die Abstoßung von allogenen Knochenmarkzellen, Unverträglichkeit in dem ABO-System, akute und chronische Formen der "Graft-versus-Host" -Reaktion.

In den Patienten nach der Transplantation ABO-inkompatiblen Knochenmark idioagglutinin Typ „Wirt gegen Spender ABO“ produziert innerhalb 330-605 Tage nach der Transplantation, die verlängert Hämolyse und einem starken Anstieg der Bedarf an Bluttransfusionen führen kann. Die genannte Komplikation wird durch Transfusion von Erythrozyten Gruppen nur 0. Nach der Transplantation in einer Reihe von Patienten, die die Autoimmun Neutropenie, Thrombozytopenie, Panzytopenie, oder, für die Korrektur verhindert, die Splenektomie durchgeführt werden muß.

In 35-40% der Empfänger von akuten Reaktion „Graft-versus-host“ entwickelt sich innerhalb von 100 Tagen nach der Transplantation von allogenen hämoglobin identische Knochenmark. Der Grad der Hautläsionen, Leber und Darm variiert von Ausschlag, Hyperbilirubinämie, Durchfall und mild zur Haut Schuppung, Darmverschluss und akuten Leberversagen. Patienten mit Thalassämie Frequenz akuter Reaktion „Graft versus Host“ I Ausmaß nach der Transplantation des Knochenmarks ist 75%, II und höheres Ausmaß - 11-53%. Chronische Reaktion „Graft-versus-host“ als systemisches Multiorgansyndrom entwickelt sich normalerweise innerhalb von 100-500 Tage nach der Transplantation von allogenen Knochenmark bei 30-50% der Patienten. Betroffen sind Haut, Mund, Leber, Augen, Speiseröhre und obere Atemwege. Unterscheiden begrenzte Form der chronischen Reaktion „Graft versus Host“, wenn die betroffene Haut und / oder die Leber und weit verbreitet, generaliHautLäsionen bei Kombination mit chronisch aggressiver Hepatitis, Augenkrankheit, die Speicheldrüsen oder jedem anderen Organe. Die Todesursache sind oft die infektiösen Komplikationen, die durch schwere Immunschwäche verursacht werden. 3% und schwere - - hat 0,9% des Empfängers von HLA-kompatibelen allogenen Knochenmark in Thalassämie chronischer milder Form der Reaktion „Graft-versus-host“ wurde in 12%, moderate gefunden. Eine ernsthafte Komplikation bei der Knochenmarktransplantation ist die Transplantatabstoßung, die sich 50 bis 130 Tage nach der Operation entwickelt. Die Sperrfrequenz hängt vom Konditionierungsmodus ab. Insbesondere Patienten mit Thalassämie bei der Herstellung von Methotrexat allein behandelt, Abstoßung von Transplantatknochenmark wird in 26% der Fälle beobachtet, Kombinationen von Methotrexat mit Cyclosporin A - 9%, und bei der Zuordnung nur Cyclosporin A - 8% der Fälle (Haziyev usw. ., 1995).

Infektiöse Komplikationen nach Knochenmarktransplantation verursachen Viren, Bakterien und Pilze. Ihre Entwicklung ist mit tiefer Neutropenie verbunden, die während der Chemotherapie Anlage induziert wird, Zytostatika Schleimhautbarrieren und Reaktions besiegen „Graft-versus-host“. Je nach Entwicklungszeitpunkt werden drei Phasen von infektiösen Komplikationen unterschieden. Entzündliche und Gram-negative Bakterien, Candida-Pilze - In der ersten Phase (im ersten Monat nach der Transplantation zu entwickeln) durch Schäden an die Schleimhaut-Barriere und Neutropenie dominiert wird, oft durch virale Infektionen (Herpes, Epstein-Barr-Virus, Cytomegalovirus, Varicella zoster), sowie Infektionen durch grampolozhi verursacht begleitet , Aspergillome. In der frühen Phase nach der Transplantation (die zweiten und dritte Monate nach der Transplantation) ist die schwerste Cytomegalovirus-Infektion, die oft zum Tod der Patienten in der zweiten Phase der Infektion führt. Thalassämie Cytomegalovirus-Infektion nach Transplantation von Knochenmark kommt in 1,7-4,4% des Empfängers. Die dritte Phase wird in der späten Phase nach der Transplantation (drei Monate nach der Operation) beobachtet und ist durch schwere kombinierte Immunschwäche gekennzeichnet. Diese Periode wird häufig Infektionen durch Varicella zoster, Streptokokken, Pneumocystis Carini, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae und hepatotropic Viren gefunden. Thalassämie Mortalität bei Patienten nach Knochenmarktransplantation mit Bakterien- und Pilzsepsis, idiopathische interstitielle Pneumonie und Cytomegalovirus, acute respiratory distress syndrome, akute Herzinsuffizienz, Herzbeuteltamponade, Hirnblutung, venookklyuzionnoy Lebererkrankungen und akuten Reaktion „Graft versus Host“ zugeordnet.

Gegenwärtig sind bestimmte Fortschritte bei der Entwicklung von Verfahren zur Isolierung einer reinen Population von hämatopoetischen Stammzellen aus dem Knochenmark gemacht worden. Die Technik zur Gewinnung von fötalem Blut aus der Nabelschnur wurde verbessert, und es wurden Verfahren zum Isolieren von blutbildenden Zellen aus Nabelschnurblut entwickelt. In der wissenschaftlichen Presse wird berichtet, dass hämatopoetische Stammzellen, wenn sie in Medien mit Zytokinen kultiviert werden, sich vermehren können. Bei Verwendung speziell entwickelter Bioreaktoren für die Expansion von HSC ist die Biomasse von hämatopoetischen Stammzellen, die aus Knochenmark, peripherem oder Nabelschnurblut isoliert wurden, signifikant erhöht. Die Möglichkeit der HSC-Expansion ist ein wichtiger Schritt in der klinischen Entwicklung der Zelltransplantation.

Vor der Reproduktion von HSC in vitro ist es jedoch notwendig, eine homogene Population hämatopoetischer Stammzellen zu isolieren. Dies wird üblicherweise unter Verwendung von Markern erreicht, die eine selektive Markierung von HSCs mit monoklonalen Antikörpern, die kovalent an eine fluoreszierende oder magnetische Markierung gebunden sind, ermöglichen und sie unter Verwendung eines geeigneten Zellsortierers isolieren. Gleichzeitig ist das Problem der phänotypischen Eigenschaften hämatopoetischer Stammzellen noch nicht endgültig gelöst. A. Petrenko., V. Hryschenko (2003) als Kandidat für GSK-Zellen behandelt, die auf der Oberfläche vorhanden sind, von CD34, AC133 und Thyl Antigenen und keine CD38, HLA-DR und anderem Marker der Differenzierung (Zellen mit dem Phänotyp CD34 + Liir). Lineare Differenzierungsmarker (Linie, Lin) umfassen Glycophorin A (GPA), CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20 (Münch, 2001). Perspektive für die Transplantation sind Zellen mit dem Phänotyp CD34 + CD45RalüW CD71low, sowie CD34 + Thyl + CD38low / c-kit / niedrig.

Das Problem der Anzahl von HSCs, die für eine wirksame Transplantation ausreichend sind, bleibt ein Problem. Gegenwärtig sind die Stammzellen, die Blut bilden, das Knochenmark, das periphere Blut und Nabelschnurblut sowie die embryonale Leber. Die Expansion der hämatopoetischen Stammzellen wird erreicht, indem sie in Gegenwart von Endothelozyten und hämatopoetischen Wachstumsfaktoren kultiviert werden. In verschiedenen Protokollen werden Myeloproteine, SCF, Erythropoietin, insulinähnliche Wachstumsfaktoren, Corticosteroide und Östrogene verwendet, um die HSC-Proliferation zu induzieren. Wenn Kombinationen von Zytokinen in vitro verwendet werden, kann ein signifikanter Anstieg des HSC-Pools erreicht werden, mit einem Höhepunkt ihrer Freisetzung am Ende der zweiten Woche der Kultivierung.

Traditionell wird HSC-Nabelschnurblut hauptsächlich in Hämoblastosen verwendet. Die minimale Dosis von hämatopoetischen Zellen, die für eine erfolgreiche Transplantation von Nabelschnurblutzellen notwendig ist, beträgt 3,7 × 10 ⁷ kernhaltige Zellen pro 1 kg Körpergewicht des Empfängers. Die Verwendung einer geringeren Menge an HSC erhöht signifikant das Risiko von Transplantatversagen und Rückfall der Krankheit. Daher wird die Transplantation von blutbildenden Zellen aus Nabelschnurblut hauptsächlich bei der Behandlung von Hämoblastose bei Kindern verwendet.

Leider gibt es noch keine Standards für die Beschaffung sowie standardisierte Protokolle für die klinische Verwendung von Nabelschnurblut hämopoetischen Zellen. Dementsprechend sind Nabelschnurblutstammzellen selbst keine gesetzlich anerkannte Quelle für hämatopoetische Zellen zur Transplantation. Darüber hinaus gibt es weder ethische noch rechtliche Normen, die die Tätigkeit und Organisation von Nabelschnurblutbanken, die im Ausland verfügbar sind, regeln. Zur sicheren Transplantation sollten alle Proben von Nabelschnurblut sorgfältig überwacht werden. Bevor eine Blutprobe von einer schwangeren Frau gesammelt wird, muss ihre Zustimmung eingeholt werden. Jeder schwanger muss auf einem Schlitten von HBsAg, Antikörper gegen Hepatitis-C-Virus, HIV, Syphilis und untersucht werden. Jede Nabelschnurblutprobe sollte routinemäßig auf die Anzahl der kernhaltigen Zellen, CD34 + und koloniebildende Fähigkeit getestet werden. Zusätzlich werden HLA-Typisierung, Bestimmung der Blutgruppe nach ABO und deren Zugehörigkeit zum Rhesus-Faktor durchgeführt. Testverfahren sind Ernten auf bakteriologische Sterilität, serologische Tests, die für HIV-1 und HIV-2-Infektion, HBsAg, Hepatitis-C-Virus, Zytomegalie, ntly ntly-1 und II, Syphilis, Toxoplasmose. Zusätzlich wird eine Polymerasekettenreaktion durchgeführt, um Cytomegalovirus- und HIV-Infektion nachzuweisen. Es scheint angebracht, die Analyse von Protokollen Test Nabelschnurblut HSCs zu ergänzen solche genetischen Krankheiten wie Thalassämie und Sichelzellanämie, Adenosindesaminase-Mangel, Agammaglobulinämie Bruton, Krankheit Harlera und Punter zu identifizieren.

In der nächsten Phase der Vorbereitung auf die Transplantation stellt sich die Frage nach der Erhaltung von GSK. Die gefährlichsten für die Lebensfähigkeit von Zellen bei der Vorbereitung sind Gefrier-und Auftauverfahren. Beim Einfrieren der hämatopoetischen Zellen kann ein wesentlicher Teil von ihnen aufgrund der Kristallbildung zerstört werden. Um den Prozentsatz des Zelltods zu reduzieren, werden spezielle Substanzen verwendet - Kälteschutzmittel. Meistens wird DMSO als Kälteschutzmittel in einer Endkonzentration von 10% verwendet. Für DMSO ist diese Konzentration jedoch durch eine direkte zytotoxische Wirkung gekennzeichnet, die sich selbst unter minimalen Expositionsbedingungen manifestiert. Die Verringerung der zytotoxischen Wirkung wird durch strikte Einhaltung der Nullpunkttemperatur des Expositionsmodus sowie durch Einhaltung des Verfahrens zur Verarbeitung des Materials im Prozess und nach dem Auftauen (Geschwindigkeit aller Manipulationen, Anwendung von wiederverwendbaren Waschverfahren) erreicht. Verwenden Sie keine DMSO-Konzentration von weniger als 5%, da in diesem Fall der Massensterben hämatopoetischer Zellen während der Gefrierperiode erfolgt.

Das Vorhandensein von Verunreinigungen roter Blutkörperchen in der Suspensionsmischung GSK erzeugt die Gefahr, eine Inkompatibilitätsreaktion für Erythrozytenantigene zu entwickeln. Zur gleichen Zeit, mit der Entfernung von Erythrozyten, nimmt der Verlust von hämatopoetischen Zellen signifikant zu. In diesem Zusammenhang wurde ein Verfahren zur unfraktionierten Trennung von GCS vorgeschlagen. In diesem Fall wird die kernhaltigen Zellen vor den schädlichen Auswirkungen von niedrigeren Temperaturen unter Verwendung von 10% DMSO-Lösung und Abkühlen mit einer konstanten Geschwindigkeit (HS / min) bis -80 ° C zu schützen, wonach die Zellsuspension wurde in flüssigem Stickstoff eingefroren. Es wird angenommen, dass mit dieser Kryokonservierungstechnik eine partielle Lyse der Erythrozyten stattfindet, daher erfordern Blutproben keine Fraktionierung. Vor der Transplantation wird die Zellsuspension aufgetaut, frei von Hämoglobin und DMSO in einer Lösung von Humanalbumin oder Serum gewaschen. Erhaltung von hämatopoetischen Vorläufern dieser Methode ist in der Tat höher als nach Nabelschnurblut-Fraktionierung, aber die Gefahr von Komplikationen durch Transfusion von ABO-inkompatiblen Transfusionen von Erythrozyten gespeichert.

Die Einrichtung eines Systems von Banken für die Lagerung von HSC-getesteten und HSC-Proben könnte die obigen Probleme lösen. Dazu müssen jedoch ethische und rechtliche Normen entwickelt werden, die nur noch diskutiert werden. Vor der Schaffung eines Bankennetzwerks müssen einige Bestimmungen und Dokumente zur Standardisierung der Verfahren für Probenahme, Fraktionierung, Prüfung und Typisierung sowie Kryokonservierung von GCW verabschiedet werden. Eine obligatorische Bedingung für den effektiven Betrieb der GSK-Banken ist die Organisation einer Computerbasis für die Verbindung mit den Registern der Welt-Geber-Medullär-Gesellschaft (WMDA) und des Nationalen Spender-Medullär-Programms der Vereinigten Staaten (NMDP).

Darüber hinaus ist es notwendig, die Methoden der HSC-Expansion in vitro, primär hämatopoetische Nabelschnurblutzellen, zu optimieren und zu standardisieren. Die Reproduktion von HSC-Nabelschnurblut ist notwendig, um die Anzahl möglicher Empfänger zu erhöhen, die mit dem HLA-System kompatibel sind. Aufgrund der geringen Mengen an Nabelschnurblut ist die Menge an HSC, die darin enthalten ist, in der Regel nicht in der Lage, eine Knochenmarkrepopulation bei erwachsenen Patienten bereitzustellen. Gleichzeitig ist es für die Durchführung nicht verwandter Transplantationen notwendig, Zugang zu einer ausreichenden Anzahl typischer GSK-Proben zu haben (von 10.000 bis 1.500.000 pro 1 Empfänger).

Die Transplantation von hämatopoetischen Stammzellen beseitigt keine Komplikationen, die eine Knochenmarktransplantation begleiten. Die Analyse zeigt, dass bei der Transplantation von Nabelschnurblutstammzellen schwere Formen der akuten "Graft-versus-Host" -Reaktion bei 23%, chronisch bei 25% der Empfänger auftreten. Bei onkohämatologischen Patienten werden in 26% der Fälle innerhalb eines Jahres nach Transplantation von HSC-Nabelschnurblut Rezidive von akuter Leukämie beobachtet.

In den letzten Jahren haben sich die Transplantationsmethoden von peripheren hämatopoetischen Stammzellen intensiv entwickelt. Der Gehalt an HSC im peripheren Blut ist so gering (es gibt 1 GSK pro 100.000 Blutzellen), dass ihre Isolierung ohne spezielle Vorbereitung keinen Sinn ergibt. Daher erhält der Spender zuvor einen Verlauf der Arzneimittelstimulation der Freisetzung von hämatopoetischen Knochenmarkszellen in das Blut. Zu diesem Zweck werden so weit harmlose Medikamente wie Cyclophosphamid und Granulozytenkolonie-stimulierender Faktor verwendet. Aber selbst nach dem Verfahren zur Mobilisierung von HSC in peripherem Blut übersteigt der Gehalt an CD34 + -Zellen darin nicht 1,6%.

Um HSC in der Klinik zu mobilisieren, wird häufiger C-CEC verwendet, das sich durch eine relativ gute Verträglichkeit auszeichnet, mit Ausnahme des fast regelmäßigen Auftretens von Schmerzen in den Knochen. Es sollte angemerkt werden, dass die Verwendung moderner Blutseparatoren es ermöglicht, Stammvorläuferzellen der Hämatopoese effizient zu isolieren. Unter Bedingungen normaler Hämatopoese müssen jedoch mindestens 6 Verfahren durchgeführt werden, um eine ausreichende Anzahl von hämatopoetischen Stammzellen zu erhalten, vergleichbar mit der Repopulationskapazität der Knochenmarksaufschlämmung. Bei jedem dieser Verfahren verarbeitet der Separator 10-12 Liter Blut, was Thrombozytopenie und Leukopenie verursachen kann. Das Trennverfahren beinhaltet die Verabreichung eines Antikoagulans (Natriumcitrat) an den Spender, was jedoch die Kontaktaktivierung von Blutplättchen während der extrakorporalen Zentrifugation nicht ausschließt. Diese Faktoren schaffen Bedingungen für die Entwicklung von infektiösen und hämorrhagischen Komplikationen. Ein weiterer Nachteil des Verfahrens liegt in der beträchtlichen Variabilität der Mobilisierungsreaktion, die eine Überwachung des Gehalts an HSC in peripheren Blutspendern erfordert, die zur Bestimmung ihres maximalen Spiegels erforderlich ist.

Die autologe Transplantation von HSC schließt im Gegensatz zur allogenen vollständig die Entwicklung der Abstoßungsreaktion aus. Ein signifikanter Nachteil der Autotransplantation von hämatopoetischen Stammzellen, der das Spektrum der Indikationen auf ihr Verhalten begrenzt, ist jedoch eine hohe Wahrscheinlichkeit der Reinfusion von leukämischen Klonzellen mit einem Transplantat. Darüber hinaus erhöht das Fehlen eines Immun-vermittelten "Graft-versus-Tumor" -Effekts signifikant die Häufigkeit von Rezidiven von malignen Blutkrankheiten. Daher bleibt der einzige radikale Weg, neoplastische klonale Hämopoese zu beseitigen und die normale polyklonale Hämatopoese bei myelodysplastischen Syndromen wiederherzustellen, eine intensive Polychemotherapie mit Transplantation von allogenem GSK.

Aber auch in diesem Fall zielt die Behandlung für die meisten Hämoblastosen nur darauf ab, die Überlebenszeit der Patienten zu verlängern und ihre Lebensqualität zu verbessern. Nach mehreren großen Studien wird bei 40% der onkohämatologischen Patienten ein verlängertes krankheitsfreies Überleben nach HSC-Allotransplantation erreicht. Bei Verwendung von Stammzellen von HbA-kompatiblen Geschwistern werden die besten Ergebnisse bei jungen Patienten mit einer kurzen Krankheitsgeschichte, der Anzahl der Blasten bis zu 10% und einer günstigen Zytogenetik beobachtet. Leider ist die Mortalität im Zusammenhang mit der HSC-Allotransplantation bei Patienten mit myelodysplastischen Erkrankungen hoch (in den meisten Berichten - etwa 40%). Die Ergebnisse der 10-jährigen Arbeit des Nationalen Knochenmark-Spender-Programms (510 Patienten, Durchschnittsalter - 38 Jahre) zeigen, dass das krankheitsfreie Überleben für zwei Jahre 29% mit einer relativ geringen Wahrscheinlichkeit eines erneuten Auftretens (14%) ist. Jedoch ist die Mortalität, die durch das Verfahren der GSC-Allotransplantation von einem nicht verwandten Spender verursacht wird, extrem hoch und erreicht 54% über einen Zeitraum von zwei Jahren. Ähnliche Ergebnisse wurden in der europäischen Studie erhalten (118 Patienten, Durchschnittsalter 24 Jahre, 2 Jahre rezidivfreies Überleben 28%, Rezidiv 35%, Mortalität 58%).

Bei Intensivkursen mit anschließender Wiederherstellung der Hämatopoese durch allogene hämatopoetische Zellen treten oft immunhämatologische und transfusionale Komplikationen auf. In vielerlei Hinsicht sind sie mit der Tatsache verbunden, dass Blutgruppen in Menschen unabhängig von MHC-Molekülen vererbt werden. Selbst wenn Spender und Empfänger mit den HLA-Hauptantigenen kompatibel sind, können ihre Erythrozyten daher einen anderen Phänotyp aufweisen. Zuteilen „groß“, wenn Inkompatibilität präexistieren im Rezipienten-Antikörper gegen Antigene des Spenders roten Blutkörperchen, und „klein“, wenn die Spender-Antikörper gegen Antigene von roten Blutzellen des Empfängers. Es gibt Fälle einer Kombination von "großen" und "kleinen" Inkompatibilitäten.

Die Ergebnisse der vergleichenden Analyse der klinischen Wirksamkeit von Knochenmark und hämatopoetischen Stammzellen von Nabelschnurblut-Allotransplantaten in hämatologischen Malignitäten zeigen, dass Kinder Allotransplantation GSK Nabelschnurblut signifikant das Risiko einer Reaktion „Graft versus Host“ reduziert, aber es ist eine längere Zeit der Erholung der Neutrophilen und der Blutplättchen eine höhere Häufigkeit einer 100-tägigen Mortalität nach Transplantation.

Das Studium der Ursachen der frühen Letalität hat es ermöglicht, die Kontraindikationen für die allogene Transplantation von GSK zu klären, unter denen die wichtigsten sind:

• Vorhandensein von positiven Tests auf Cytomegalovirus-Infektion im Empfänger oder Spender (ohne Durchführung einer vorbeugenden Behandlung);
• akute Strahlenkrankheit;
• Vorhandensein oder gar Verdacht auf das Vorhandensein einer Mykosen bei dem Patienten (ohne systemische Frühprophylaxe mit fungiziden Wirkstoffen);
• Hämoblastosen, bei denen die Patienten längere Zeit mit Zytostatika behandelt wurden (wegen der hohen Wahrscheinlichkeit eines plötzlichen Herzstillstandes und eines multiplen Organversagens);
• Transplantation von HLA-nicht-identischen Spendern (ohne Verhinderung der akuten "Transplantat gegen Wirt" -Reaktion durch Cyclosporin A);
• chronische virale Hepatitis C (aufgrund eines hohen Risikos für die Entwicklung einer veno-okklusiven Erkrankung der Leber).

Daher kann eine GSK-Transplantation ernsthafte Komplikationen verursachen, die oft zum Tod führen. Im frühen (bis zu 100 Tage nach der Transplantation) Zeitraum dieser schließen infektiöse Komplikationen, akute Reaktion „Graft versus Host“, Transplantatabstoßung (neprizhivlenie HSC Donor), Lebererkrankung venookklyuzionnaya sowie aufgrund der Konditionierung Toxizität, Gewebeschäden, für die die hohe charakteristischen die Geschwindigkeit der Remodellierung (Haut, Gefäßendothel, Darmepithel). Komplikationen der späten Phase nach der Transplantation sind chronische Reaktion von „Graft-versus-host“ Wiederholung der zugrunde liegenden Erkrankung, Wachstumsverzögerung bei Kindern, Beeinträchtigung der Fortpflanzungsfunktion und Schilddrüse Augenkrankheit.

Kürzlich ist im Zusammenhang mit dem Erscheinen von Veröffentlichungen über die Plastizität von Knochenmarkzellen die Idee entstanden, GSK zur Behandlung von Herzinfarkten und anderen Krankheiten zu verwenden. Obwohl einige Experimente an Tieren diese Möglichkeit ebenfalls unterstützen, müssen die Schlussfolgerungen über die Plastizität von Knochenmarkzellen bestätigt werden. Dieser Umstand sollte von denjenigen Forschern berücksichtigt werden, die glauben, dass die transplantierten Zellen des menschlichen Knochenmarks leicht in Skelettmuskel-, Myokard- oder ZNS-Zellen umgewandelt werden können. Die Hypothese, dass GSKs eine natürliche zelluläre Quelle für die Regeneration dieser Organe sind, erfordert ernsthafte Beweise.

Insbesondere veröffentlichte die ersten Ergebnisse einer offenen, randomisierten Studie BELENKOVA V. (2003), dessen Zweck - die Wirkung von C-SIS zu untersuchen (dh Mobilisierung von Eigenblut HSZ) auf klinische, hämodynamische und neurohumorale Status von Patienten mit mittelschwerer bis schwerer chronischer Herzinsuffizienz, sowie ihre Sicherheitsbewertung mit der Standardtherapie (ACE-Hemmer, Beta-Blocker, Diuretika, Herzglykoside). Die erste Veröffentlichung der Ergebnisse der Autoren des Forschungsprogramms beachten Sie, dass das einzige Argument für O-CBP sind die Ergebnisse der Behandlung eines Patienten, der während der Therapie mit diesem Medikament unbestreitbare Verbesserung in allen klinischen und hämodynamischen Parameter gefunden. Allerdings hat die Theorie der HSZ Mobilisierung in den Blutstrom, gefolgt von Regeneration des Herzmuskels in Postinfarktzone nicht bestätigt - auch bei Patienten mit einer positiven klinischen Dynamik von Stress-Echokardiographie mit Dobutamin nicht die Entstehung von vitalem Myokard in den Narbenbereichen des Feldes ergeben hat.

Es ist anzumerken, dass Daten, die eine Substitutionstherapie zur weit verbreiteten Einführung in den klinischen Alltag ermöglichen, derzeit nicht ausreichend sind. Eine gut gemachte und qualitative Durchführung von klinischen Studien, die die Wirksamkeit der verschiedenen Möglichkeiten der regenerativen Zelltherapie, die Entwicklung von Indikationen und Kontraindikationen zu ihm, sowie Leitlinien für den kombinierten Einsatz von regenerativen und Kunststoff-Therapie und konventioneller chirurgischer oder konservativen Behandlung zu bestimmen. Bisher keine Antwort auf die Frage, welche Art von einer Population von Knochenmarkzellen (hämatopoetische Stamm- oder Stroma) kann zu Neuronen und Kardiomyozyten geben, und ist nicht klar, welche Bedingungen dieses in vivo beitragen.

Die Arbeit in diesen Bereichen wird in vielen Ländern durchgeführt. In der Zusammenfassung des Symposiums auf akutes Leberversagen markierte die US National Institutes of Health unter den vielversprechenden Behandlungsmethoden, zusammen mit einer Lebertransplantation, Transplantation Xenon oder allogenen Hepatozyten und in-vitro-Bioreaktoren Verbindung mit den Leberzellen. Es gibt direkte Hinweise, dass nur fremde, funktionell aktive Hepatozyten die Leber des Empfängers wirksam unterstützen können. Für die klinische Verwendung von isolierten Hepatozyten ist es notwendig, eine Zellbank zu schaffen, die die Zeit zwischen der Freisetzung der Zellen und ihrer Verwendung signifikant reduzieren wird. Für die Schaffung einer Bank isolierter Hepatozyten ist die Kryokonservierung von Leberzellen in flüssigem Stickstoff am besten geeignet. Bei der Verwendung solcher Zellen in der Klinik bei Patienten mit akuter und chronischer Leberinsuffizienz zeigte sich eine recht hohe therapeutische Wirkung.

Trotz der optimistischen und ermutigenden Ergebnisse der Anwendung der Leberzelltransplantation im Experiment und in der Klinik sind viele Probleme noch weit von ihrer Lösung entfernt. Dazu gehört die begrenzte Menge an geeigneten Stellen auf isolierte Hepatozyten ungenügend wirksame Methoden der Trennung zu erhalten, den Mangel an standardisierten Methoden der Leberzellen Fuzzy Verständnis der Mechanismen der Regulation des Wachstums und die Proliferation der transplantierten Zellen zu bewahren, der Mangel an geeigneten Methoden Verpflanzung Bewertung oder Ablehnung von allogenen Hepatozyten. Dies sollte auch die Anwesenheit von Transplantationsimmunität umfasst die Verwendung von allogenen oder xenogenen Zellen, wenn auch weniger als in orthotope Lebertransplantation, aber erfordern die Anwendung von Immunsuppressiva, isolierten Hepatozyten oder spezielle Verarbeitung Enzym eingekapselt wird. Die Transplantation von Leberzellen führt oft zu einer Immun Konflikte zwischen Empfänger und Spender in einer Abstoßungsreaktion, die die Verwendung von Zytostatika erfordert. Eine Lösung für dieses Problem ist, mikroporöse Polymer Medien zu verwenden, um die Leberzellen zu isolieren, die ihr Überleben verbessern, da der Kapselmembran effektiv die Hepatozyten schützt, trotz der Wirt Immunisierung.

Bei einer akuten Leberinsuffizienz ist jedoch eine solche Transplantation von Hepatozyten aufgrund der ausreichend langen Zeit, die für die Einpflanzung von Leberzellen in ein neues Medium bei Erreichen des Stadiums der optimalen Funktion erforderlich ist, nicht wirksam. Eine potenzielle Einschränkung ist die Sekretion von Gallen ectopic Transplantation von isolierten Hepatozyten, und als Bioreaktoren wesentliche physiologische Barriere wirkt Spezies Diskrepanz zwischen dem menschlichen Proteinen und Proteinen, die unter Verwendung von xenogenen Hepatozyten erzeugen.

In der Literatur gibt es Berichte, dass die lokale Transplantation von Stroma-Stammzellen Knochenmark effiziente Korrektur von Knochendefekten erleichtert, und die Knochenwiederherstellung in diesem Fall ist intensiver als bei spontaner reparative Regeneration. Mehrere präklinische Studien in experimentellen Modellen haben überzeugend die Möglichkeit der Verwendung von Knochenmarkstroma-Knochenmarktransplantaten in der Orthopädie gezeigt, obwohl weitere Arbeit benötigt wird, um diese Techniken zu optimieren, sogar in den einfachsten Fällen. Insbesondere wurden die optimalen Bedingungen für die Expansion von osteogenen Stromazellen ex vivo noch nicht gefunden, die Struktur und Zusammensetzung ihres idealen Trägers (Matrix) bleiben unbearbeitet. Die minimale Anzahl von Zellen, die für die Massenknochenregeneration erforderlich ist, wird nicht bestimmt.

Es ist erwiesen, dass mesenchymale Stammzellen transgermale Plastizität aufweisen - die Fähigkeit, sich zu Zelltypen zu differenzieren, die phänotypisch nicht mit den Zellen der ursprünglichen Linie verwandt sind. Unter optimalen Kultivierungsbedingungen überleben die polyklonalen Linien von Stammzellen des Knochenmarkstroma in vitro mehr als 50 Unterteilungen, was es ermöglicht, Milliarden von Stromazellen aus 1 ml Knochenmarkaspirat zu erhalten. Allerdings ist die Population von mesenchymalen Stammzellen durch Heterogenität gekennzeichnet, die sich als Variabilität manifestiert sich in kolonie Größen unterschiedliche Geschwindigkeiten der Bildung und der morphologischen Vielfalt von Zelltypen - aus Fibroblasten-ähnlichen spindelförmigen zu große flache Zellen. Nach 3 Wochen der Kultivierung der Stroma-Stammzellen ist die phänotypische Heterogenität beobachtet: einige Kolonien bilden Knötchen des Knochengewebes, andere - Ansammlungen von Adipozyten, andere, seltener, Inseln von Knorpelgewebe.

Zur Behandlung von degenerativen Erkrankungen des zentralen Nervensystems wurde zuerst die Transplantation von embryonalem Nervengewebe verwendet. In den letzten Jahren wurden anstelle des Gewebes des embryonalen Gehirns die zellulären Elemente der Neurosphären aus neuralen Stammzellen transplantiert (Poltavtseva, 2001). Neurosphären enthalten engagierte neurale Vorläuferzellen und Neuroglia - das gibt Hoffnung auf Wiederherstellung verlorener Gehirnfunktionen nach ihrer Transplantation. Nach Transplantation von Zellen von dispergierten Neurosphären in das Striatum des Rattenhirns wurde deren Proliferation und Differenzierung zu dopaminergen Neuronen festgestellt, was die motorische Asymmetrie bei Ratten mit experimentellem Hemiparkinsonismus beseitigte. In einigen Fällen entwickelten sich jedoch Tumorzellen aus den Zellen der Neurosphäre, was zum Tod von Tieren führte (Bjorklund, 2002).

Die Klinik sorgfältige Untersuchung von zwei Gruppen von Patienten, bei denen weder die Patienten noch die Ärzte wussten sie (double-blind), dass eine Gruppe von Patienten transplantiert embryonalem Gewebe mit Neuronen, die Dopamin produzieren beobachten, eine zweite Gruppe von Patienten einen falschen Schritt, gab unerwartete Ergebnisse . Patienten, die mit embryonalem Nervengewebe transplantiert wurden, fühlten sich nicht besser als die Patienten der Kontrollgruppe. Des Weiteren 5 von 33 Patienten nach 2 Jahren nach der Transplantation von embryonalen Nervengewebe entwickelt persistent Dyskinesie, die keine Kontroll-Patienten-Gruppe hatte (Stammzellen: wissenschaftliche Fortschritte und zukünftige Forschungsrichtungen Nat Inst, of Health USA ...). Eines der ungelösten Probleme der klinischen Studien der Hirnnervenstammzellen ist die Analyse der realen Möglichkeiten und Grenzen ihrer Derivate Transplantation zur Korrektur von ZNS-Störungen. Es ist möglich, dass ein längere Anfallsaktivität neyronogenez im Hippocampus, was zu seinen strukturellen und funktionellen Veränderungen induziert wird, kann ein Faktor bei der fortschreitenden Entwicklung von Epilepsie sein. Eine solche Schlussfolgerung verdient besondere Aufmerksamkeit, da sie mögliche negative Konsequenzen der Erzeugung neuer Neuronen im reifen Gehirn und die Bildung von aberranten synaptischen Verbindungen anzeigt.

Es sollte nicht vergessen werden, dass die Kultivierung in Umgebungen mit Zytokinen (Mitogenen) die Eigenschaften von Stammzellen denen von Tumorzellen annähert, da enge Veränderungen in der Regulierung von Zellzyklen auftreten, die die Fähigkeit zur uneingeschränkten Teilung bestimmen. Es ist töricht, frühe Ableitungen von embryonalen Stammzellen auf den Menschen zu übertragen, da in diesem Fall die Gefahr der Entwicklung von malignen Neoplasmen sehr groß ist. Es ist viel sicherer, ihre engagierteren Nachkommen, dh Vorläuferzellen differenzierter Linien, zu verwenden. Gegenwärtig ist jedoch noch keine zuverlässige Technik zum Erhalten stabiler humaner Zelllinien, die in die richtige Richtung differenzieren, entwickelt worden.

Der Einsatz molekularbiologischer Technologien zur Korrektur von Erbkrankheiten und menschlichen Erkrankungen mit Hilfe der Stammzellmodifikation ist für die praktische Medizin von großem Interesse. Merkmale des Genoms von Stammzellen ermöglichen die Entwicklung von einzigartigen Transplantationsschemata mit dem Ziel, genetische Krankheiten zu korrigieren. Aber in dieser Richtung gibt es auch eine Reihe von Einschränkungen, die überwunden werden müssen, bevor die praktische Anwendung der Gentechnik von Stammzellen beginnt. Vor allem ist es notwendig, den Prozess der Stammzellgenommodifikation ex vivo zu optimieren. Es ist bekannt, dass eine verlängerte (3-4 Wochen) Proliferation von Stammzellen ihre Transfektion reduziert, so dass mehrere Transfektionszyklen notwendig sind, um ein hohes Niveau ihrer genetischen Modifikation zu erreichen. Das Hauptproblem hängt jedoch mit der Dauer der Expression des therapeutischen Gens zusammen. Bis jetzt, in keiner der Studien, die Periode der effektiven Expression nach der Transplantation der modifizierten Zellen nicht mehr als vier Monate. In 100% der Fälle ist die Expression transfizierter Gene aufgrund der Inaktivierung von Promotoren und / oder des Absterbens von Zellen mit einem modifizierten Genom im Laufe der Zeit reduziert.

Ein wichtiges Problem sind die Kosten für die Verwendung zellulärer Technologien in der Medizin. Zum Beispiel beträgt der geschätzte jährliche Finanzierungsbedarf für nur die medizinischen Kosten einer Knochenmarktransplantationsabteilung, die 50 Transplantationen pro Jahr durchführen soll, ungefähr 900.000 US-Dollar.

Die Entwicklung zellulärer Technologien in der klinischen Medizin ist ein komplexer und mehrstufiger Prozess, der die konstruktive Zusammenarbeit multidisziplinärer wissenschaftlicher und klinischer Zentren mit der internationalen Gemeinschaft umfasst. Gleichzeitig wird der wissenschaftlichen Organisation der Forschung auf dem Gebiet der Zelltherapie besondere Aufmerksamkeit geschenkt. Die wichtigsten davon sind die Entwicklung von Protokollen für klinische Studien, die Überwachung der Validität klinischer Daten, die Bildung eines nationalen Forschungsregisters, die Integration in internationale Programme multizentrischer klinischer Studien und die Einführung von Ergebnissen in die klinische Praxis.

Zum Abschluss der Einführung in der Zelltransplantation Fragen, würde Ich mag die Hoffnung zum Ausdruck bringt, dass die gemeinsamen Anstrengungen von führenden Experten in der Ukraine aus verschiedenen Bereichen der Wissenschaft bedeutende Fortschritte bei der experimentellen und klinischen Studien gewährleisten und werden in den kommenden Jahren ermöglichen, effektive Wege zu finden, schwer kranke Menschen in Not von Organtransplantationen zu helfen , Gewebe und Zellen.

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