Sauzern-Blotten
Zuletzt überprüft: 23.04.2024
Alle iLive-Inhalte werden medizinisch überprüft oder auf ihre Richtigkeit überprüft.
Wir haben strenge Beschaffungsrichtlinien und verlinken nur zu seriösen Medienseiten, akademischen Forschungseinrichtungen und, wenn möglich, medizinisch begutachteten Studien. Beachten Sie, dass die Zahlen in Klammern ([1], [2] usw.) anklickbare Links zu diesen Studien sind.
Wenn Sie der Meinung sind, dass einer unserer Inhalte ungenau, veraltet oder auf andere Weise bedenklich ist, wählen Sie ihn aus und drücken Sie Strg + Eingabe.
Southern Blotting (entwickelt von E. Southern und R. Davies im Jahr 1975) ist die Hauptmethode, mit der Gene einer bestimmten Krankheit identifiziert werden. Dazu wird DNA aus den Zellen des Patienten extrahiert und mit einer der Restriktionsendonukleasen (oder mehreren) prozessiert. Die resultierenden Fragmente werden einer Elektrophorese unterzogen, die es ihnen ermöglicht, in der Größe zu bemessen (kleinere Fragmente bewegen sich schneller durch die Poren des Gels). Dann werden die Fragmente auf einen Nitrocellulosefilter übertragen (neu gedruckt), auf dem die radiomarkierte Sonde geschichtet ist. Die Sonde bindet nur an die komplementäre Sequenz. Dann wird durch das Verfahren der Autoradiographie die Position des gewünschten Fragments der genomischen DNA auf dem Elektrophorese-Diagramm bestimmt.
Hybridisierung mit den markierten DNA-Sonde oder RNA-DNA-Präparationen, tropfzugefügt an der festen Matrix ohne vorherige Restriktion und Elektrophorese Dot und Slot-Hybridisierung genannt, je nach der Konfiguration der DNA-Spots auf dem Filter (rund oder länglich, jeweils).
[