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Gesundheit

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In-situ-Hybridisierung

 
, Medizinischer Redakteur
Zuletzt überprüft: 04.07.2025
 
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Das Hybridisierungsverfahren kann nicht nur auf einem Gel, auf Filtern oder in Lösung, sondern auch auf histologischen oder chromosomalen Präparaten durchgeführt werden. Diese Methode wird In-situ -Hybridisierung genannt. Eine Variante der Methode, bei der mit Fluorochromen markierte DNA- oder RNA-Präparate als Sonden verwendet werden, wird FISH (Fluorescein-in-situ-Hybridisierung) genannt. Die markierte DNA-Sonde wird auf Präparate aus differentiell gefärbten und für die Hybridisierung vorbereiteten (denaturierten) Metaphasenchromosomen aufgetragen. Eine Vorbehandlung der Chromosomen dient dazu, der Sonde den Zugang zur genomischen DNA zu erleichtern. Nach dem Abwaschen ungebundener DNA-Moleküle und dem Auftragen einer lichtempfindlichen Emulsion (bei Verwendung einer radioaktiven Markierung) oder einer entsprechenden Behandlung (bei Verwendung von Biotin- oder Fluorescein-markierten DNA-Sonden) können die Lokalisierungsstellen von DNA-Sequenzen, die komplementär zur verwendeten DNA-Sonde sind, mittels Mikroskopie direkt als charakteristische Punkte über den entsprechenden Abschnitten bestimmter Chromosomen erkannt werden.

Mit dieser Forschungsmethode können wir nicht nur die chromosomale Zugehörigkeit, sondern auch die intrachromosomale Lokalisierung des untersuchten Gens bestimmen.

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